Resumo

Introdução: Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight (MALDI-TOF) é uma tecnologia revolucionária para identificação de microrganismos. Recentemente tem sido usado para a identificação de espécies de Mycobacterium. A identificação convencional de espécies de Mycobacterium é muito trabalhosa e requerer muito tempo. Técnicas moleculares, como Polymerase Chain Reaction (PCR) e Sequenciamento, requerem profissionais especializados e habilitados. O presente estudo teve como objetivo comparar o desempenho do MALDI TOF para identificação de micobactérias frente às técnicas moleculares (PCR IS6110, sequenciamento do gene hsp65 e 16s). Materiais e métodos: Para a identificação pelo MALDI TOF foi realizada a extração utilizando o protocolo de acordo com Saleeb e Murray et al. E utilizado o aparelho MT (Bruker Daltonics BD). O atual software e dados de base para a análise os resultados foi Biotyper 3.0. Para esse trabalho foram usadas 55 cepas, sendo 6 cepas ATCCs, 14 cepas CAP, 35 cepas de isolados clínicos. As cepas do Complexo M. tuberculosis (MTB) foram identificadas pelo método de PCR da inserção IS6110, exceto 2 cepas que foram identificadas pelo sequenciamento hsp65 e/ou 16s. As cepas não pertencentes ao Complexo M. tubertculosis (NTB) foram identificadas pelo sequenciamento do gene hsp65 e/ou do gene 16s, e paralelamente foi realizada a identificação pelo MALDI Tof. Classificamos como aceitáveis cepas com score acima de 1.7 no MALDI TOF. Resultados: Das 55 cepas, 52 (94,6%) cepas foram concordantes com o resultado da técnica molecular, 2 (3,6%) não obtiveram pico pelo método do MADI TOF e 1 (1,8%) cepa não foi concordante com o resultado da técnica molecular, identificando erroneamente apenas a espécie. Das 52 cepas concordantes, 7 tiveram score abaixo de 1,7. Conclusão: Apesar do pequeno número de amostras testadas, podemos concluir que o MALDI TOF teve um excelente desempenho quando comparado ao método de referência e pode ser implementado na rotina de microbiologia para a identificação de espécies de Mycobacterium.