Resumo

O Cryptococcus neoformans é uma levedura encapsulada que apresenta a capacidade de causar quadros clínicos severos em vários órgãos ou sistemas. Particularmente, a presença desta cápsula polissacarídica dificulta a ação do sistema imune, conferindo assim uma das características de patogenicidade desta levedura que possui um importante tropismo pelo sistema nervoso central. O fenômeno Killer é outro fator de virulência que pode ser investigado em leveduras, ocorrem devido à produção de proteínas com propriedades antimicótica, as chamadas toxinas Killer. O sistema Killer pode representar uma ferramenta simples, barata, sensível e reprodutível para a biotipagem de micro-organismos de importância clínica. Este trabalho objetivou detectar a produção da toxina Killer por C. neoformans. As leveduras obtidas de pacientes imunossuprimindos, portadores da Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS) foram identificadas através de critérios morfológicos, bioquímicos e fisiológicos. A presença do fenótipo Killer foi testada em meio YEPD suplementado com 0,003% de azul de metileno. Leveduras sensíveis padrão (Saccharomyces cerevisiae NCYC 1006 e Candida glabrata NCYC Y-55) foram ativadas em Agar YEPD, suspensas em solução salina e em seguida foram espalhadas com Swab estéril sob a superfície do meio. As leveduras testadas também foram ativadas em Agar YEPD- azul de metileno e inoculadas em um único ponto equidistante da toxina padrão (K1) na superfície das placas semeadas com as leveduras sensíveis. As placas foram incubadas a 25 ⁰C por 72 horas. Os 31 isolados de C. neoformans testados apresentaram padrões específicos de produção de proteína Killer, através da mudança de coloração da colônia de creme para azul. A atividade Killer apresentada em todas as leveduras pode ser considerada como mais uma ferramenta para auxiliar a tipificação de linhagens de leveduras, que permitem a discriminação de linhagens clínicas almejadas principalmente pela facilidade de execução e por terem menor custo quando comparado com métodos moleculares.