Resumo

Sorotipos de Salmonella estão entre os mais importantes patógenos transmitidos por alimentos, causando milhões de casos de diarreia esporádica e surtos da doença no mundo todo. S. enterica subsp. enterica sorovar Enteritidis é o principal sorotipo isolado atualmente no país. A eletroforese em campo pulsado (PFGE) é uma técnica baseada na macro-restrição de DNA genômico seguida da separação eletroforética de fragmentos de alta massa molecular. É amplamente utilizada para a tipagem de microorganismos e considerada como o padrão ouro para estudos epidemiológicos. Este estudo teve como objetivo verificar a variabilidade genética de isolados de Salmonella Enteritidis envolvidos em surtos de diarreia. Para tanto, foram analisados 17 cepas de Salmonella Enteritidis isoladas de adultos e crianças com diarreia no estado do Paraná e previamente identificadas ao nível bioquímico e por teste sorológico. Quatro cepas são oriundas de um surto ocorrido em 2010 em Curitiba, 6 de um surto ocorrido em Três Barras em 2011, 4 de um surto detectado em Cruzeiro em 2011, e 3 envolvidas num surto ocorrido em Cascavel em 2012. A PFGE foi realizada segundo o protocolo do PulseNet proposto por Ribot et al, 2006. A análise de PFGE, realizada com a enzima XbaI, revelou 3 perfis distintos entre as 17 cepas analisadas. Os perfis foram designados como perfil A (10 bandas, variando de 25 a 1000 kb), perfil B (11 bandas, de 25 a 1000 kb) e perfil C (14 bandas, 25 a 900 kb). Os perfis A e B diferem apenas pela presença de uma banda de aproximadamente 50 Kb. Em relação às 4 cepas isoladas em Curitiba, duas apresentaram o perfil A e as demais o perfil B. Este resultado sugere que se trata de 2 clones distintos, embora relacionados, da bactéria; e também que houve 2 surtos no mesmo período. Por sua vez, todos os isolados de Três Barras e também os de Cascavel compartilharam o perfil B, indicando que um mesmo clone de Salmonella Enteritidis está envolvido nestes dois surtos de diarreia ocorridos em localidades distintas. E por fim, das 3 cepas isoladas das culturas de fezes dos doentes envolvidos no surto ocorrido em Cascavel, duas apresentam o perfil B e a outra o perfil C, que apresenta padrão de bandas nitidamente distinto. Isso indica a participação de clones distintos de Salmonella Enteritidis nesses casos de doença, e sugere também o envolvimento de fontes de contaminação distintas. Estes dados mostram a importância da utilização de técnicas epidemiológicas moleculares na investigação de surtos. Entre os 17 isolados de Salmonella Enteritidis analisados 14 apresentaram o perfil B sugerindo que este é o clone predominante associado com surtos de diarreia no Paraná.