Resumo

A produção de enzimas, em particular as β-lactamases, caracteriza o mecanismo de resistência mais importante em enterobactérias. As carbapenemases são β-lactamases capazes de hidrolisar a maioria dos antibióticos β-lactâmicos, incluindo os carbapenêmicos. No Brasil, é cada vez maior o número de relatos de enterobactérias produtoras de carbapenemases, de diferentes classes e capacidades hidrolíticas. O objetivo desse estudo foi descrever o primeiro relato das β-lactamases OXA-370 e NDM-1 em um mesmo isolado do complexo Enterobacter cloacae no Brasil. A amostra bacteriana foi obtida a partir de um estudo de vigilância em um hospital terciário, no qual Enterobactérias com sensibilidade reduzida aos carbapenêmicos foram analisadas. As amostras foram submetidas a PCR em tempo real HRM para os genes bla_NDM, bla_KPC, bla_VIM, bla_GES, bla_OXA-48-like e bla_IMP. Os produtos de amplificação foram submetidos a sequenciamento e o GenBank foi utilizado para obtenção das sequências depositadas dos genes bla_NDM-1, bla_OXA-370 e outras sequências bla_OXA-48-like. O software BioEdit foi utilizado para comparar a similaridade entre as sequências. A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada por Etest. Foi realizado teste de Hodge modificado (MHT) e teste dos discos combinados com EDTA. Em 29/10/2013, foi coletado do paciente EBP, masculino, 71 anos, um swab retal, do qual foi realizada cultura de vigilância. O paciente havia sido internado oito dias antes na Unidade de Cirurgia Vascular em função de complicações decorrentes da diabetes (“pé diabético”). Um isolado com reduzida sensibilidade aos carbapenêmicos foi identificado como pertencente ao complexo E. cloacae e a determinação da CIM apresentou elevada resistência aos β-lactâmicos, quinolonas e aminoglicosídeos, permanecendo sensível a polimixinas e tigeciclina. Os testes fenotípicos para pesquisa de carbapenemases apresentam resultados positivos. A PCR em tempo real apresentou amplificações com temperatura de desnaturação parcial (“Temperature of melting” – Tm) similares aos controles positivos para bla_NDM e bla_OXA-48-like. O sequenciamento dos produtos de amplificação revelou fragmentos compatíveis com bla_NDM-1 e bla_OXA-370. Neste trabalho foi relatado o primeiro caso de isolado do complexo Enterobacter cloacae co-produtor de OXA-370 e NDM-1. A presença concomitante de dois mecanismos de resistência aos β-lactâmicos ressalta a elevada capacidade de disseminação dos genes codificantes para essas enzimas e a importância da identificação desses mecanismos.