Resumo

Introdução: A histoplasmose é uma micose sistêmica causada pelo fungo dimórfico Histoplasma capsulatum. O longo período necessário para seu crescimento em meios de cultura e o fato de que nem todas as cepas de H. capsulatum produzem os macroconídios e microconídios característicos são alguns dos fatores que levam ao diagnóstico laboratorial inconclusivo da histoplasmose. Além do cultivo, a técnica de imunodifusão dupla para pesquisa de anticorpos tem sido utilizada como auxiliar ao diagnóstico laboratorial, porém baixos títulos de anticorpos, sobretudo em pacientes imunodeprimidos, podem levar a resultados falso-negativos. Com o intuito de buscar soluções para um diagnóstico mais rápido para esta micose, o presente estudo avaliou a resposta de 30 isolados de H. capsulatum a quatro métodos fenotípicos: imunodifusão dupla e western blot para pesquisa de antígenos, produção de urease e produção de melanina. Materiais e métodos: Os 30 isolados estavam depositados na Coleção de Fungos do Laboratório de Micologia do INI/IPEC-FIOCRUZ. Para a avaliação da produção de exoantígenos, todas as amostras foram cultivadas em meio BHI líquido durante sete dias a 25°C em estufa com agitação de 150rpm. Após este período o sobrenadante das culturas foi concentrado 50x e avaliado pelas técnicas de imunodifusão e western blot. O teste de urease foi realizado a partir da adição de um inóculo de 500µl de uma suspensão de leveduras 2,0 na escala Mc Farland em caldo úreia de Christensen incubado a 37°C por sete dias. A produção de melanina foi verificada através de um inóculo pontual de um fragmento micelial em placas contendo meio mínimo e meio mínimo acrescido de L-Dopa e incubados a 25°C durante 30 dias, protegidas da luz. Resultados: Todos os isolados foram positivos no teste de produção de urease e apresentaram antígeno H e/ou M quando avaliados pelo western blot. A técnica de imunodifusão dupla utilizada para pesquisa de antígenos, foi positiva em apenas uma das amostras. Apenas seis isolados produziram melanina nas condições analisadas. Conclusão: As técnicas de imunodifusão e produção de melanina não apresentaram bons resultados, porém, os testes de produção de urease e western blot podem ser considerados boas ferramentas auxiliares na identificação de cepas de H. capsulatum, uma vez que se caracterizam por serem técnicas sensíveis, baratas e de fácil execução.