Resumo

Aeromonas são bacilos gram-negativos de habitat aquático, capazes de causar um amplo espectro de doenças em humanos, variando de diarréia não complicada, infecção de feridas à septicemia. A transmissão da bactéria aos humanos pode ocorrer através da ingestão de água e alimentos contaminados, e por contato direto de ferimentos com água contaminada. As espécies de Aeromonas mais frequentemente associadas com infecções em humanos são A. hydrophila, A. caviae e A. veronii sobria. A Eletroforese em Campo Pulsado (PFGE) é uma técnica molecular de tipagem considerada atualmente como o padrão ouro em análises epidemiológicas por permitir a diferenciação clonal dos patógenos estudados. O objetivo deste trabalho é determinar o perfil de PFGE de 9 estirpes de Aeromonas isoladas de fezes de pacientes com diarréia no estado do Paraná. Estas estirpes foram previamente identificadas como A. veronii bv sobria através de métodos microbiológicos convencionais e “Random Fragment Length Polymorphism” (RFLP) de 16S rDNA. O protocolo de PFGE utilizado para a análise das estirpes foi o proposto por Livesley et al. 1999, que utiliza a endonuclease de restrição XbaI para a digestão do DNA genômico. As corridas eletroforéticas para a separação dos fragmentos de restrição gerados pela enzima foram realizadas em sistema CHEF DR III (Bio-Rad). Como marcador de massa molecular foi utilizada Salmonella enterica Braendrup BAA-644, preparada da mesma forma que as estirpes analisadas. Nove perfis distintos de PFGE foram observados. As bandas geradas pela digestão com a enzima XbaI variaram entre 28,8 a 398,4 kilobases (Kb), e o número de bandas observadas nos diferentes perfis de PFGE variou de 18 a 27. Nenhum perfil de PFGE foi compartilhado entre as estirpes analisadas, sugerindo que há uma elevada diversidade em A. veronii bv sobria. Isto sugere também que os agentes causadores dos casos de diarreia, embora pertencendo a mesma espécie, provêm de fontes de contaminação distintas. Os resultados sugerem que há ao menos 9 clones de A. veronii bv sobria associados com diarréia circulando no Paraná.