Resumo

Aeromonas são bactérias capazes de causar uma variedade de infecções em humanos, sendo as gastroenterites as doenças mais comumente provocadas por estes patógenos. A dificuldade para identificar Aeromonas ao nível de espécie através dos testes microbiológicos convencionais tem levado à utilização de ensaios moleculares, em especial o sequenciamento de genes essenciais como gyrB, que codifica a subunidade B da enzima DNA girase requerida para a duplicação do DNA. O objetivo desse trabalho é comparar os resultados da identificação molecular através de sequenciamento de DNA do gene gyrB, com a identificação microbiológica convencional. Foram analisadas 20 estirpes de Aeromonas isoladas de pacientes com diarreia, identificadas previamente ao nível de espécie através de testes bioquímicos sendo 7 estirpes A. veronii bv sobria, 7 como A. caviae, 5 como A.hydrophila e 1 como A.trota. As bactérias foram cultivadas em ágar MacConkey por 18 horas em aerobiose e temperatura de 36ºC. Após este período as colônias foram utilizadas para a extração de DNA pelo método da fervura. O gene gyrB foi amplificado por PCR e os produtos da reação foram purificados utilizando as enzimas Exonuclease III (Exo) e Fosfatase alcalina de camarão (SAP) e então submetidos à reação de sequenciamento utilizando o kit BigDye. Os resultados do sequenciamento de gyrB identificaram 7 estirpes como A. veronii, 6 como A. caviae e 3 como A. hydrophila. A comparação desses resultados com os da identificação bioquímica indicou divergências na identificação de 4 estirpes. No primeiro caso, a identificação bioquímica apontou uma A. trota, enquanto o sequenciamento revelou uma A. veronii. No segundo caso, a identificação bioquímica apontou uma A. caviae, enquanto que o sequenciamento de gyrB indicou que a bactéria é A. hydrophila. E por fim, a identificação convencional indicou duas estirpes como sendo A. hydrophila, mas o sequenciamento de gyrB revelou que se trata de A. aquariorum e A. caviae. Essas divergências podem ser devidas a diversidade bioquímica, às reações atípicas apresentadas por estirpes de Aeromonas, e ainda ao fato de que novas espécies tem sido recentemente descritas. A correta identificação do enteropatógeno é essencial para o diagnóstico adequado, para rastreamento de surtos e a realização de estudos epidemiológicos.