Resumo

Introdução: Paracoccidioidomicose é uma doença sistêmica causada por Paracoccidioides brasiliensis e P. lutzii. A tecnologia de espectrometria de massas MALDI-TOF (Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization – Time of Flight) ainda não foi analisada para identificação das duas espécies e pode ser uma nova ferramenta para tal. Objetivos: padronizar a identificação das espécies de P. brasiliensis e P. lutzii por MALDI-TOF. Materiais e Métodos: quatro isolados de P. brasiliensis e três de P. lutzii previamente caracterizados por análise multilocus foram incluídas. Colônias leveduriformes obtidas em meio sólido Fava-Netto foram submetidas à extração por álcool etílico 70% e ácido fórmico. Após diluição em acetonitrila e centrifugação a 13.000 rpm por 3 minutos, 1,2 μL do sobrenadante foram depositados em placa de aço polido, com posterior aplicação de 1,2 μL da matriz ácido α-ciano-4-hidroxicinâmico. Os espectros de massas (EM) foram obtidos no equipamento Autoflex (Bruker, Alemanha) com parâmetros estabelecidos pelo fabricante para identificação de microrganismos. Análises pós-analíticas foram realizadas no software Biotyper 3.1 (Bruker, Alemanha). Os resultados são expressos em valores de logscore entre 0 e 3, sendo que 0 não há correlação entre o EM do analito e espectro de referência da base de dados do fabricante, e valores acima de 2 são necessários para identificação de espécie segundo o fabricante. Resultados: obtivemos de dois padrões distintos de espectros de massas com clara distinção entre as espécies. Não houve identificação cruzada entre elas, porém valores de logscore superior a 2,3 foram necessários para distinção das espécies. Conclusão: os resultados obtidos demonstram que a espectrometria de massas MALDI-TOF é um método que permite a distinção entre as espécies de P. brasiliensis e P. lutzii.