ANAIS :: MICROAL 2014
Resumo: 366-1


Poster (Painel)
366-1EFEITO CITOTÓXICO E INATIVAÇÃO FOTODINÂMICA DE Staphylococcus aureus COM ERITROSINA E SEUS DERIVADOS
Autores:Yassunaka, N. N. (UEM - Universidade Estadual de Maringá) ; Penha, C. B. (UEM - Universidade Estadual de Maringá) ; Silva, A. F. (UEM - Universidade Estadual de Maringá) ; Santos, P. R. (UEM - Universidade Estadual de Maringá) ; Souza, K. S. (UEM - Universidade Estadual de Maringá) ; Freitas, C. F. (UEM - Universidade Estadual de Maringá) ; Hioka, N. (UEM - Universidade Estadual de Maringá) ; Ueda-Nakamura, T. (UEM - Universidade Estadual de Maringá) ; Mikcha, J. M. G. (UEM - Universidade Estadual de Maringá)

Resumo

As enfermidades de origem alimentar não causam somente transtornos à saúde e bem estar dos indivíduos afetados, mas também se associam a graves consequências econômicas para a sociedade. Staphylococcus aureus é um patógeno de grande importância, pois é frequentemente responsável por intoxicações alimentares. O presente trabalho avaliou o efeito da Inativação Fotodinâmica utilizando como Fotossensibilizadores (FS’s), a Eritrosina (ERI) e seus derivados ésteres metil (ERIMET) e butil (ERIBUT) frente à bactéria Staphylococcus aureus ATCC 25923, bem como a citotoxicidade dos FS’s em células VERO ATCC CCL81. Os FS’s foram diluídos em Tampão Fosfato-Salino pH 7,4 (PBS) e Dimetil Sulfóxido 5% (DMSO). As células foram cultivadas em meio DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino (SFB) e 50 µg/ml de gentamicina, sendo incubadas a 37 °C com 5% de CO2. Foram semeadas em microplacas de 96 poços (2,5 x 104 células/poço) e incubadas até a obtenção de 90% de confluência celular. Diferentes concentrações dos FS’s foram adicionadas e após 48h de incubação as placas foram reveladas pelo método de MTT e a concentração tóxica para 50% das células (CC50) foi determinada. A cultura bacteriana de S. aureus incubada a 35 ºC/24h em Caldo Triptona de Soja (TSB) foi coletada por centrifugação, lavada e ressuspendida em solução salina 0,85% estéril. O inóculo foi ajustado a 108 Unidades Formadoras de Colônia (UFC)/mL e diluído a uma concentração final de 105 UFC/mL no experimento. A suspensão foi incubada no escuro com os FS’s (1,0 x 10-5M) por 10 minutos e iluminada por 5 minutos. A fonte de luz utilizada foi o Diodo Emissor de Luz (LED) de cor verde com λ de 508nm e potência de 0,5W. Dois grupos controle foram utilizados; 1 – (FS + Inóculo) e 2 – (Inóculo + Tampão PBS + DMSO), ambos incubados no escuro e não iluminados. Amostras tratadas e os controles foram diluídos e semeados em Ágar Triptona de Soja (TSA) a 35 ºC/24h. Os resultados mostraram que células vegetativas de S. aureus após tratamento obtiveram uma redução de 5 log para todos os FS’s. Com exceção do derivado ERIBUT, que não se mostrou tóxico nas concentrações testadas (CC50 > 10-5M), os demais FS’s apresentaram valores de CC50 entre 5,53 e 8,8 x 10-6M. Conclui-se que, concentrações menores de FS’s e tempos de exposição maiores poderiam ser investigados como uma alternativa mais segura para o uso em alimentos.


Palavras-chave:  Citotoxicidade, Eritrosina, Inativação fotodinâmica, Staphylococcus aureus