Resumo

Ramnolipídios (RLs) são glicolipídios compostos por moléculas de ramnose (região hidrofílica) e ácido graxo (região hidrofóbica) unidos entre si por uma ligação O-glicosídica. (Abdel-Mawgoud et al. 2010). A proposta de pesquisa na área de produção de RLs é baseada no potencial de exploração comercial destes biossurfactantes, principalmente pelos níveis significativos de rendimento e ao seu uso diversificado, podendo ser usado na biorremediação, indústrias farmacêuticas, alimentícias e de química fina. Estes fatos aliados a baixa toxicidade, biodegradabilidade e propriedades tenso-ativas, tornam os RLs compostos muito atrativos para a indústria e consequentemente sua demanda tende a ser crescente. Mutantes de Pseudomonas aeruginosa foram obtidos utilizando o transposon ISlacZ/hah (Jacobs et al. 2003). Mutantes afetados na biossíntese de RLs foram detectados por alteração no halo após o cultivo em meio mineral sólido contendo azul de metileno e CTAB. Mutantes deficientes no acúmulo de PHA (polihidroxialcanoatos) foram detectados por diferenças na opacidade das colônias após cultivo em meio mineral contendo excesso de fonte de carbono (glicose) e limitados na fonte de nitrogênio. Um total de 9840 mutantes foram cultivados nos meios citados acima e destes 196 mutantes foram selecionadas por estarem afetados na biossíntese de RLs e/ou PHAs. As linhagens selecionadas foram cultivadas em meio mineral líquido contendo glicose e óleo de soja como fontes de carbono e analisados quanto a capacidade de produção de RLs e PHAs de forma a detectar aqueles que apresentam capacidade de produção de compostos diferenciados, ou seja, que devem estar afetados em diferentes genes relacionados ao metabolismo desses compostos. Nesta segunda fase de seleção obtiveram-se linhagens superprodutoras de RLs, 2,1 g/l na linhagem selvagem e 8,3 g/l na linhagem mutante, bem como linhagens que não produziram RLs. Foi também analisado a composição dos homólogos de RLs produzidos pelas linhagens selvagem e mutante, verificando que não houve uma grande diferença na composição obtida. O próximo passo do trabalho será detectar os genes afetados utilizando o transposon podendo levar ao esclarecimento do controle genético da produção de RLs. Referências Abdel-Mawgoud et al. Appl Microbiol Biotechnol 86: 1323-1336, 2010. Jacobs et al. PNAS 25: 14339-14344, 2003 Agradecimentos: FAPESP