Resumo

As principais enfermidades causadas por Ureaplasma diversum em bovinos estão relacionadas a problemas respiratórios, urogenitais, nas glândulas mamárias e articulações, causando artrites, mastite, infertilidade, vulvaginite, aborto, manifestando-se na forma aguda, apesar de normalmente ser de caráter crônico. Esses micro-organismos contribuem para perdas econômicas importantes, tais como, diminuição na taxa de crescimento e no ganho de peso, além dos custos com profilaxia e drogas terapêuticas. Sabe-se que os Mollicutes são naturalmente resistentes aos antibióticos que agem inibindo a síntese da parede celular, ou seja, são resistentes aos antibióticos β-lactâmicos, sulfonamidas e rimfamicina. Tratamento de infecções causadas por ureaplasma está limitado a tetraciclinas, macrolídeos e fluoroquinolonas, porém, resistência a todas essas três classes de antibióticos tem sido documentada. Para isto, foram utilizados isolados clínicos de bovinos resistentes a antibióticos de U. diversum, que foram testados contra Fluoroquinolonas (Ciprofloxacina e Enrofloxacina), Tetraciclinas (Oxitetraciclina), Cloranfenicol, Macrolídeos (Claritromicina e Tilosina), Aminoglicosídeo (Gentamicina) e Diterpenos (Tiamulina Fumarato) pelo método da Determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Citometria de Fluxo que foi utilizada para avaliar a atividade antimicrobiana de antibióticos. Para a avaliação da presença dos genes de resistência, foi realizada a extração de DNA dos isolados pelo método de fervura, a partir de 1mL das amostras, e em seguida a padronização da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) com os primers: Par 1545R/ Par C -5A; Gyr A 1655R/ Gyr -1A; Gyr A 1504F/ Gyr A 2743R; Gyr B -4A/ Gyr B 98F; Par C 1367F/ Par C 2553R; Par C -6A/ Par C -7A; Par E -54/ Par E -8A; e Gyr B-3A/ Gyr A -2A. Após a padronização, com o produto da PCR foi realizado a eletroforese em gel de agarose a 1%. Os fragmentos foram considerados positivos quando apresentaram os genes de resistência com 1216pb. As amostras que apresentaram os genes de resistência, foram submetidas a uma nova reação de PCR, foram purificadas com o kit Purelink e estão sendo seqüenciados para análises filogenéticas. Com os dados obtidos, espera-se obter um perfil de resistência a antibióticos das cepas testadas, podendo guiar medidas de um melhor tratamento das infecções causadas por estes micro-organismos.