Resumo

O Brasil é responsável por 85% da produção mundial de suco de laranja e 56% da produção de laranja in natura. A cultura dos citros é hospedeira de diversas pragas, entre elas o bicho-furão-dos-citros,Ecdytolopha aurantiana(Lima, 1927) (Lepidoptera: Tortricidae). Este inseto está presente em toda América do Sul e sua ocorrência é relatada em nove estados brasileiros. Atualmente, o controle do bicho-furão-dos-citros tem sido realizado com produtos químicos, fisiológicos e biológicos, este através de pulverizações em cobertura com formulações à base de Bacillus thuringiensis. A atividade inseticida de B. thuringiensis é atribuída principalmente aos cristais paraesporais os quais são compostos de um ou mais tipos de proteínas tóxicas, como as Cry, que possuem especificidade para insetos de diferentes ordens. O objetivo deste trabalho foi identificar linhagens de B. thuringiensis que apresentem alta toxicidade para E. aurantiana utilizando técnicas moleculares associadas às ferramentas de bioinformática e bioensaios iniciais com larvas de primeiro ínstar de E. aurantiana para seleção das linhagens com atividade contra este inseto. Vinte linhagens de B. thuringiensis foram bioensaiadas e selecionadas para a caracterização por PCR para diversos genes cry com iniciadores descritos em literatura. Por sequenciamento, foi possível a identificação do gene cry1I em cinco linhagens, sendo que as sequências obtidas foram homólogas a região central do gene. Sendo assim, novos iniciadores foram selecionados a partir de regiões consenso conservadas, homólogas às sequências de outros genes cry1I depositadas em bancos de sequências de DNA, visando obter as sequências das extremidades do gene, até a obtenção da sequência completa do mesmo, pela metodologia primer walking. Para a seleção dos iniciadores, foi utilizado o programa Gene Runner v3.05. Foram selecionados quatro pares de iniciadores, os quais permitiram a extensão das sequências completas dos genes, classificando-o em relação a outros genes cry dentro de um banco de sequências desses genes. Atualmente, os genes obtidos estão sendo amplificados e clonados para a utilização em aplicações biotecnológicas. Apoio Financeiro: CAPES e CNPq.