XXI ALAM
Resumo:1671-2


Poster (Painel)
1671-2ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DE MYCOBACTERIAS EM AMOSTRAS DE ÁGUAS SUPERFICIAIS COLETADAS NO LAGO DE JUTURNAÍBA-RJ
Autores:Silvia Maria de Almeida Machado (FIOCRUZ-IOC - Fundação Oswaldo Cruz-Instituto Oswaldo Cruz) ; Dalton Marcondes Silva (FIOCRUZ-IOC - Fundação Oswaldo Cruz-Instituto Oswaldo Cruz) ; Glaucia Silva Vaz (FIOCRUZ-IOC - Fundação Oswaldo Cruz-Instituto Oswaldo Cruz) ; Maria Helena Férez Saad (FIOCRUZ-IOC - Fundação Oswaldo Cruz-Instituto Oswaldo Cruz) ; Viviane Zanher (FIOCRUZ-IOC - Fundação Oswaldo Cruz-Instituto Oswaldo Cruz)

Resumo

O Lago de Juturnaíba (LJ) situa-se entre os municípios de Silva Jardim e Araruama/RJ (22º 33’S e 42º 18’W), pertencendo à Bacia de drenagem do Rio São João, possui afluentes com águas de diferentes qualidades e diversidade morfofisionômica de ambientes. Na década de 70 foi construída sobre o Rio São João a represa de Juturnaíba para acumular maior volume de água e garantir o abastecimento domiciliar e industrial na Região dos Lagos com uma população estimada de 170 mil habitantes. Como parte de um estudo maior de caracterização da qualidade das águas da LJ quanto as variáveis físico-quimicas e microbiológicas o presente estudo foi realizado para demonstrar a presença de micobacterias. Para tal, foram coletadas 72 amostras de água de 8 diferentes pontos em 6 coletas consecutivas. As amostras foram concentradas em membranas filtrantes e os resíduos eluídos em solução salina. Os eluatos foram descontaminados com H2SO4 4% e semeados em meios sólidos de Loëwestein Jensen incubados a 370 C e observados por 42 dias. A identificação fenotípica foi realizada pelo tempo de crescimento e a coloração Ziehl-Neelsen. Os genes: a) 16s rRNA (primers P515fw e P1175rw e gr2fw e rm582r rw) b) dnak (primers dnaKF1fw e dnaKR1rw) e c) hsp65 (primers Tb11 e Tb12) foram sequenciados e alinhados às sequencias contidas no Gen Bank através do Blast-n para a identificação das amostras. Foram isoladas 33 cepas dos diferentes pontos de coletas. Os pontos 1 (30,7%), 2 (24,2%) e 7 (18,2%) apresentaram maior frequência de isolamento de bacilos alcool-ácido resistentes (BAAR). Não houve diferença estatística no número de amostras isoladas nas estações: seca 54,5% (18/33) e chuvosa 45,5% (15/33). Todas eram BAAR, tempo de crescimento secundário variando de 5 à 25 dias sendo a maioria de crescimento rápido (72% , 13/18 ) e 27,78% (5/18) de crescimento lento. De acordo com o sequenciamento para 16s rRNA com P515(fw) P1175(rw) e gr2 (fw) rm582r (rw) 90,1% (20/22) e 89% (16/18) das amostras, respectivamente, pertencem ao gênero Mycobacterium, mas pelo gene dnaK e hsp65 obteve-se percentual mais elevado 100% (26/26) e 95,24% (20/21). Maior frequência de isolamento de BAAR foi obtida nos pontos 1, 2 e 7 em todas as coletas, pontos associados a atividade humana das comunidades do entorno da LJ. A alta frequência dos resultados de sequenciamento com os genes propostos sugere serem marcadores com poder discriminatório suficientes para identificação de Mycobacterium sp. em amostras ambientais.


Palavras-chave:  Mycobacterias, Mycobacterias não tuberculosas, NTM, sequenciamento genes hsp65 DNAk 16srRna