Resumo

OS AVANÇOS NA ÁREA DA BIOLOGIA MOLECULAR TÊM PERMITIDO RÁPIDA E CONFIÁVEL IDENTIFICAÇÃO DE LEVEDURAS DO GÊNERO Candida, ATUALMENTE IMPRESCINDÍVEL PARA O DIRECIONAMENTO DA TERAPÊUTICA DE PACIENTES COM CANDIDÍASE. DENTRE INÚMERAS TÉCNICAS MOLECULARES EXISTENTES, A ANÁLISE DOS POLIMORFISMOS DE FRAGMENTOS DE RESTRIÇÃO (RFLP) É UM MÉTODO RÁPIDO E SIMPLES DE EXECUTAR, QUE UTILIZA A AMPLIFICAÇÃO DE UM DETERMINADO GENE COM POSTERIOR RESTRIÇÃO ENZIMÁTICA. O OBJETIVO DO TRABALHO FOI IDENTIFICAR Candida spp. ISOLADAS DE MULHERES EM TRABALHO DE PARTO, ACOMETIDAS COM CANDIDÍASE VULVOVAGINAL, ATRAVÉS DA ANÁLISE DE RESTRIÇÃO DE FRAGMENTOS POLIMÓRFICOS. O ESTUDO CONTOU COM 16 LEVEDURAS DO GÊNERO Candida ISOLADAS DE 94 AMOSTRAS DE SWAB VAGINAL OBTIDAS DE MULHERES EM TRABALHO DE PARTO ADMITIDAS NA URGÊNCIA DA MATERNIDADE ESCOLA JANUÁRIO CICCO (UFRN) E OITO CEPAS PADRÃO DE REFERÊNCIA DA “AMERICAN TYPE CULTURE COLLECTION”. O DNA FOI EXTRAÍDO POR FERVURA, A PCR FEITA COM OS INICIADORES ITS1 E ITS4 E EM SEGUIDA, O PRODUTO DA PCR SUBMETIDO A RESTRIÇÃO COM AS ENZIMAS MspI E BfaI. A AMPLIFICAÇÃO DAS REGIÕES ITS1/ITS2 DAS CEPAS PADRÃO ATCC GEROU PRODUTOS ENTRE 500-550 PB PARA AS ESPÉCIES C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis E C. krusei E PRODUTOS DE, APROXIMADAMENTE, 600, 900, 400 E 640 PB, PARA C. guilliermondii, C. glabrata, C. lusitaniae E C. famata, RESPECTIVAMENTE. TANTO A RESTRIÇÃO PELA MspI COMO PELA BfaI FORNECEU OITO PERFIS DISTINTOS, PORÉM, A MspI NÃO PERMITIU A DIFERENCIAÇÃO DA C. albicans EM RELAÇÃO À C. dubliniensis E A BfaI NÃO PRODUZIU PADRÕES DISTINTOS ENTRE A C. ALBICANS E C. PARAPSILOSIS. EM COMPARAÇÃO AOS PERFIS GERADOS PELAS CEPAS ATCC, OS ISOLADOS REVELARAM UMA PREVALÊNCIA DE 87,5% (14/16) DE C. ALBICANS, 6,25% (1/16) DE C. tropicalis E 6,25% (1/16) DE C. glabrata. AS ENZIMAS UTILIZADAS PERMITIRAM A DISTINÇÃO ENTRE AS ESPÉCIES, PODENDO SER UTILIZADAS DE FORMA COMPLEMENTAR PARA A DIFERENCIAÇÃO ENTRE C. albicans E AS ESPÉCIES C. dubliniensis E C. parapsilosis. DESSA FORMA, COM O REQUERIMENTO DA IDENTIFICAÇÃO PARA O ESTABELECIMENTO DE UMA TERAPÊUTICA ADEQUADA E INDIVIDUALIZADA, A TÉCNICA DE PCR-RFLP CONSTITUI UM MÉTODO DE IDENTIFICAÇÃO RÁPIDO, DE EXECUÇÃO SIMPLES E BOA REPRODUTIBILIDADE.