Resumo

O emprego de microrganismos em técnicas de fermentações é uma ferramenta básica para obtenção de polímeros biodegradáveis como os polihidroxialcanoatos (PHAs). PHAs são acumulados no citoplasma bacteriano como inclusões de poliésteres insolúveis e correspondem até 90% da massa celular. A síntese de PHAs ocorre quando há condições desfavoráveis de crescimento celular e excesso de carbono. E a taxa de formação de produto geralmente é proporcional ao aumento da biomassa. A extração e caracterização de PHAs podem ser eficientemente realizadas a partir de amostras de Massa Celular Seca (MCS) dos cultivos. Entretanto, na literatura pertinente, as metodologias de determinação da MCS se mostram variáveis quanto à amostragem; sendo relatada a utilização de alíquotas que vão de 1 até 40mL. O objetivo deste trabalho foi elucidar o volume de amostra necessário para a determinação da MCS em cultivos de Beijerinckia sp. produtora de PHA; devido a importância desta análise no acompanhamento da produção de polímero intracelular. Uma linhagem de Beijerinckia sp. foi cultivada em 200mL de meio Yeast Malt, a 28ºC e 150rpm por 24h. Volumes de 1, 5, 10 e 30mL de caldo foram coletados, em frascos de peso conhecido, e centrifugados a 7000×g por 10min; o sobrenadante foi descartado e o pellet ressuspenso em 1, 5, 10 e 30mL de água destilada, respectivamente, e centrifugado novamente. Os frascos contendo o pellet foram secos em estufa a 56ºC e aferidos até peso constante. Os cultivos e as amostragens foram realizados em triplicata; os resultados expressos em g.L^-1 e analisados através da análise de variância e comparação das médias pelo teste de Tukey (α=0,05). Nas alíquotas de 1, 5 e 10mL, ocorreram variações de aproximadamente 500, 470 e 800%, respectivamente, nos pesos de MCS. Estas variações, com diferença estatística, foram observadas tanto para amostras do mesmo cultivo, quanto entre as triplicatas das fermentações. Quando utilizada alíquota de 30mL, os resultados obtidos foram coerentes entre as triplicatas de cultivo e de amostragem, não diferindo estatisticamente. Através deste estudo, fica evidente que para os cultivos de Beijerinckia sp., nas condições analisadas, é necessário coletar amostras próximas a 30mL para que os resultados tenham reprodutibilidade, portanto, os cultivos devem ser conduzidos em frascos que possibilitem no mínimo a triplicata para esta análise.