Resumo

En las últimas décadas se han desarrollado métodos para estimar de manera indirecta el número de microorganismos. El método de bioluminiscencia detecta cantidad de adenosín trifosfato (ATP) en relación con la suciedad biológica presente constituida por sustancias orgánicas de origen vegetal y animal incluyéndose a los microorganismos. En la reacción del sistema luciferina/luciferasa, la emisión luminosa es directamente proporcional a la cantidad de ATP. El luminómetro expresa las lecturas en URL (Unidades Relativas de Luz). La ventaja consiste en la obtención de resultados al instante, frente a incubaciones de diversos días. El objetivo del trabajo es evaluar el método bioluminiscencia en su relación con la presencia de microorganismos. Se utilizó luminómetro hygiena System SURE plus; placas de contacto RODAC y determinación de carbono orgánico total (COT). Se realizaron diluciones seriadas de suspensiones de cuatro microorganismos, determinándose la cantidad de UFC/ml y las URL. Resultados: Candida albicans: 44 URL en 103 UFC/ml; Pseudomonas aeruginosa: 20 URL en 105 UFC/ ml; Aspergillus brasiliensis: 13 URL en 103 UFC/ml; Clostridium sporogenes: 10 URL en 102 UFC/ml. Se determinó la cantidad de UFC y URL por 100 ml de agua en 22 muestras de la planta de tratamiento de agua para inyectables, encontrándose en promedio 2 URL y 90 UFC/ ml. Se inocularon superficies de acero inoxidable de 55 mm de diámetro con suspensiones de dos microorganismos. Se evaluó la recuperación mediante placas RODAC, determinación de URL y COT. Resultados: Staphylococcus aureus Geobacillus stearothermophilus UFC PPB(COT) Recuento RODAC URL UFC PPB(COOT) Recuento RODAC URL 1000 5.083 16 0 1000 5.273 67 0 100 4.963 1 0 100 5.223 4 0 10 4.563 0 0 10 5.150 1 1 La recuperación en las placas RODAC resultó baja, fundamentalmente para Staphylococcus aureus no detectándose URL. La determinación de COT resultó más sensible, lo que presenta al método como de elección para validaciones de limpieza. Se evidencia una amplia variabilidad en la cantidad de ATP en los diferentes microorganismos y una baja sensibilidad del método en agua y superficies. El método de bioluminiscencia se presenta como una opción para la realización de entrenamientos en procesos de limpieza y sanitización y otras aplicaciones donde se detecte material biológico en general no resultando un reemplazo de los métodos microbiológicos clásicos.