Resumo

INTRODUCCION En los últimos años los anticuerpos vienen destacándose como uno de los principales productos biotecnológicos del mundo moderno, debido a sus múltiples usos terapéuticos, diagnósticos y en investigación. Pichia pastoris ha demostrado ser una de las principales fuentes de producción por presentar alta densidad celular, poca producción de proteasas y presentar un sistema de expresión eucariota que permite un mejor plegamiento de proteínas heterólogas. En este trabajo se evaluó la producción del fragmento de anticuerpo scFv anti LDL oxidada a partir de un cultivo con distintos valores de coeficiente volumétrico de transferencia de masa (K_La). MATERTIALES Y METODOS La producción del anticuerpo se realizo en fermentador de 2L utilizando el medio de cultivo BMGY. La fase de crecimiento se realizo a 30℃ por 32 horas, posteriormente se realizo inducción con metanol 0.5% cada 12 horas con un total de 96 horas de producción. Se trabajo con dos condiciones diferentes de KLa (53h^-1 y 97h^-1) los cuales fueron constantes durante la fase de crecimiento y producción. A cada uno de los ensayos se determino, la productividad de biomasa expresada en gramos de células / L*h, y la producción de anticuerpo expresado en miligramos por gramo de célula. Las determinaciones de concentración de anticuerpo fueron realizadas por triplicado. RESULTADOS En los ensayos se observo que a mayor K_La se obtuvo mayor producción de anticuerpo y de biomasa. La productividad de biomasa con el valor más alto de K_La fue de 0.667 g/Lh, mientras que para un K_La de 53h^-1 fue de 0.487 g/Lh. La producción de anticuerpo fue de 1.02 mg anticuerpo/gramo de célula para la condición de mayor coeficiente volumétrico de transferencia de masa y de 0.90 mg de anticuerpo/gramos de célula para el ensayo con menor K_La. CONCLUSION Según los resultados observados un aumento en el valor de coeficiente de transferencia de masa (K_La) favoreció la producción del anticuerpo a partir del cultivo de Pichia pastoris.