Resumo

Muitas bactérias Gram negativas produzem AHL que funcionam como fatores transcripcionais de diferentes proteínas em condições de alta densidade. Cinco cepas isoladas de diferentes cultivares de palma foram analisadas quanto a sua capacidade de produzir AHL. Da palma miúda tradicional (P42) isolou-se através do meio NFb a cepa AM30 ( B. tropica ), a cultivar Palma de espinho frutífera (P44) também do meio NFb, isolou-se AM28 ( B. silvatlantica); da cultivar IPA 90-115, isolou-se a cepa AM37 ( H. seropedicae ), a cepa AM12 G. johanae foi isolada da cv. Chile fruit 51-1371 (P52) em meio LGI-P, e AM7, uma G. diazotrophicus , foi isolada do meio LGI-P. As cepas foram crescidas em meio DYGS até a fase estacionária. As placas de petri que continham meio YMA (Agar 2%) foram colocados cilindros de aço inoxidável de 7 mm de diâmetro estéril, no meio da placa. Foram preparados tubos de ensaio que tinha meio YMA liquido a 0,7% (agar de cobertura) onde adicionamos 300 uL da bactéria A. tumenfaciens NT1 que possui o gene lacZ e 40uL de X-Gal. Ao solidificar o meio de cobertura, retira-se os cilindros e adiciona-se 200 uL do cultivo com células e sobrenadante. Na cepa AM28, não observamos diferenças na atividade AHL em relação a presencia ou ausência de células que mostrou-se as 24 horas com um halo azul devido a ruptura do X-Gal. A cepa AM30, mostrou um halo grande as 24 horas mas aumentou o halo as 72 hs apenas usando sobrenadante. Com relação a AM12, só foi observada a atividade fraca de AHL em 72 hs tanto para células como sobrenadante. A cepa AM7 mostrou um halo muito forte somente próximo ao poço e estendendo-se de forma regular por toda a placa uma cor azulada sem diferencia a presença ou ausência de células. O mesmo resultado foi obtido pela cepa AM37. A atividade AHL tem uma importância grande no quorun sensing (QS) e é hoje reconhecido como o maior componente do gene de regulação e comunicação intercelular na bactéria e também está envolvido em outros aspectos dos micro-organismos incluindo competição e estrutura. Com estes resultados podemos sugerir que para as cepas de Bulkholderia possuem uma alta atividade de AHL podendo está associada a algum fenótipo de defesa da planta quando a mesma seja induzida por algum patógeno. Estos ensaios serão realizados em um futuro usando biosensores com plantas de palma forrageira e alguns patógenos como Fusarium e Pseudomonas.