Resumo

Os lipídeos estão entre os principais poluentes encontrados nos efluentes domésticos e industriais. Lipases (E.C. 3.1.1.3) são carboxilesterases que catalisam a hidrólise e síntese de acilgliceróis de cadeia longa (>10 carbonos), e sua utilização antes do descarte dos efluentes lipídicos no ambiente pode reduzir consideravelmente o efeito poluidor destes efluentes. Bactérias estão entre os principais organismos produtores de lipases, sendo os fatores nutricionais de grande influência sobre a produção de lipases por bactérias. Neste trabalho objetivou-se avaliar o efeito de fontes inorgânicas e orgânicas de nitrogênio sobre a produção de lipase por duas bactérias isoladas a partir de resíduos de laticínio. Os isolados Lodo 9 e Lodo 10 foram cultivados (30 °C, 200 rpm, 48 h) em frascos Erlenmeyer de 125 mL com Meio Mínimo (30 mL) contendo (g/L): KH₂PO₄ (1,5), FeCl₃ (0,05), MgSO₄ (0,2), CaCl₂ (0,01), Na₂HPO₄ (0,5) e óleo de soja (10). Cada fonte de nitrogênio foi testada separadamente das demais na quantidade de (g/L): NaNO₃ (4), KNO₃ (4,75), NH₄NO₃ (1,88), (NH₄)₂SO₄ (3,11), NH₄Cl (2,52), extrato de levedura - EL (4), peptona bacteriológica – PP (4), extrato de carne – EC (4) e extrato de malte - EM (4). Amostras (2 mL) foram removidas (0, 24 e 48 h) e centrifugadas (10.000 g/10 min) para avaliação da biomassa (DO_600nm) e da atividade lipolítica por meio da hidrólise do pNPP (37 °C, 10 min, 410 nm). Uma unidade lipase (U) foi definida como de 1 μmol de pNP liberado por minuto, por mL do sobrenadante nas condições do ensaio. Cada fonte inorgânica de nitrogênio foi adicionada ao meio de cultivo para a concentração final de 47 mM de nitrogênio. As atividades lipolíticas máximas após 48 h de cultivo variaram de 11,47 (NH₄NO₃) a 142,08 (NaNO₃) U/mL para o isolado Lodo 9, e de 3,23 (NH₄NO₃) a 110,24 (NaNO₃) U/mL para o isolado Lodo 10. A quantidade total das fontes orgânicas de nitrogênio testadas foi ajustada para 4 g/L para todas as fontes devido a impossibilidade de se determinar a quantidade de nitrogênio presente em cada fonte. Após 48 h de cultivo as atividades lipolíticas variaram de 2,01 (EM) a 18,53 (EC) U/mL para o isolado Lodo 9, e de 2,69 (EM) a 30,97 (EL) U/mL para o isolado Lodo 10. Estes resultados indicam que o NaNO₃ é a melhor fonte de nitrogênio para a produção de lipase pelos isolados Lodo 9 e 10 nas condições testadas.