Resumo

La enfermedad de Crohn (EC) y la colitis ulcerosa (CU) son enfermedades inflamatorias intestinales (EII), con etiología desconocida y caracterizadas por una disminución y desequilibrio en la microbiota normal. Agentes bacterianos han sido asociados a EC, destacando Escherichia coli adherente-invasiva (AIEC), sin embargo su participación en el inicio y/o desarrollo de la patología aún no ha sido aclarado. Objetivo. Aislar y caracterizar cepas AIEC desde mucosa intestinal de pacientes con EC, colitis ulcerosa (CU), otras patologías intestinales (OPI) y controles. Determinar su capacidad invasiva y sobrevida en cultivo celular y la inducción de una respuesta inmune en macrófagos. Metodología. Las cepas E. coli invasivas aisladas de biopsias intestinales se obtuvieron mediante ensayos de protección a gentamicina. La presencia de genes de virulencia y la heterogeneidad genética de las cepas fue caracterizada mediante PCR y electroforesis de campo pulsado (PFGE), respectivamente. Además, la capacidad invasiva y replicativa fue evaluada en líneas celulares de epitelio y macrófagos respectivamente. La secreción de citoquinas proinflamatorias en macrófagos expuestos a cepas aisladas se determinó por ELISA. Resultados. En 43% (10/23) de los pacientes con EC, 44% (4/9) de los CU, 67% (8/12) OPI y 5% (1/17) controles, se aislaron cepas de E. coli. El recuento promedio de UFC/biopsia en pacientes EC, CU y OPI fue significativamente mayor al observado en el grupo control. El análisis de factores de virulencia de las cepas analizadas muestran que los aislados de EC carecen de genes determinantes de virulencia en E. coli diarreogénicas y portan genes de E. coli extra-intestinales. El análisis de PFGE demostró que las cepas aisladas de un mismo paciente están estrechamente relacionadas (mayor 95%), pero son heterogéneas entre pacientes. La capacidad de invadir células epiteliales y replicar en macrófagos es variable en las distintas cepas. Las cepas AIEC son capaces de inducir la secreción de citoquinas como TNF-α, IL-6 e IL-1β. Conclusión. Existe una asociación de E. coli invasivas (AIEC) con pacientes chilenos afectados de EC, CU y OPI. A pesar de la heterogeneidad genética de los aislados, en su mayoría comparten genes de virulencia tales como fimH, papC, iucD.