Resumo

A enterite infecciosa aguda é um problema de saúde pública mundial, associado a índices elevados de morbidade e mortalidade especialmente nos países menos desenvolvidos. Entre os agentes da doença merece destaque Salmonella enterica, em decorrência da prevalência elevada e da gravidade do quadro clínico associado. Bacteriocinas, substâncias complexas com fração proteica biologicamente ativa, são produzidas por uma ampla variedade de bactérias Gram positivas e Gram negativas, inclusive S. enterica, e apresentam ação antimicrobiana principalmente contra bactérias taxonomicamente relacionadas. Tais substâncias parecem representar vantagem competitiva para a bactéria produtora, atuando como habilidade de virulência da mesma. Este estudo foi realizado com o objetivo de caracterizar parcialmente a atividade antagonista expressa por uma amostra de S. enterica isolada de espécime fecal de criança com diarreia aguda no Nordeste do Brasil. Como reveladora, empregou-se a amostra E. coli K12 Row. Após confirmação da expressão de antagonismo, realizou-se a pesquisa de bacteriófagos, clorofórmio, ácidos graxos e peróxido de hidrogênio, fatores que expressam atividade antibacteriana e poderiam, assim, interferir na interpretação dos dados obtidos. Então, a amostra produtora foi submetida a extração proteica por meio de precipitação com concentrações crescentes de sulfato de amônio. A fração intracelular precipitada à saturação de 50% do sal (C50) foi selecionada para as etapas subsequentes, que envolvem a caracterização da substância. Para avaliação da natureza química de C50, a fração foi submetida a tratamento com enzimas proteolíticas. A seguir, o extrato foi submetido a SDS-PAGE, em gradiente de poliacrilamida de 12.5% a 17.5%, e teste de atividade in situ, para estimativa da massa molecular da substância antagonista. Os resultados demonstraram ausência dos interferentes pesquisados, indicando tratar-se de uma substância sintetizada pela bactéria. A inativação da substância por tratamento com proteases demonstra sua natureza proteica, sugerindo a detecção de uma bacteriocina. O resultado de SDS-PAGE demonstrou presença de atividade em região correspondente a banda com massa molecular estimada de 50 a 70kDa. Para confirmação dos resultados, C50 será submetido a etapas sequenciais de cromatografia visando à purificação da fração ativa para sua posterior caracterização. Palavras chave: Salmonella enterica, bacteriocina, atividade antagonista. Agências de fomento: FAPEMIG, CAPES, CNPq e PRPq/UFMG.