Resumo

Staphylococcus aureus es capaz de generar procesos supurados como abscesos en tejidos blandos y osteomielitis. En ellos ocurre un entorno particular, con deficiencia de oxigeno y cambios en el pH. En un intento por dilucidar los mecanismos patogénicos que intervienen en estos procesos nos propusimos estudiar el perfil de secreción de proteínas en condiciones de aerobiosis y compararlas con las de anaerobiosis. Se realizaron curvas de crecimiento en anaerobiosis y aerobiosis de un aislamiento de S. aureus recuperado de un caso de osteomielitis infantil. Se realizaron extractos proteicos del sobrenadante por precipitación con TCA en la fase de crecimiento estacionaria tardía cuando la DO fue similar en ambas condiciones. Las exo-proteínas se analizaron por electroforesis 2D con tiras de isoelectroenfoque de 7 cm y rango de pH 3-10 NL. Los spots seleccionados se digirieron con tripsina y se obtuvieron espectros por MALDI-TOF. Las proteínas fueron identificadas utilizando los valores de m/z en la base de datos NCBI con la opción PMF del software Mascot. Se permitió una tolerancia para los péptidos de 1.2 Da en modo Monoisotopic, como modificaciones la oxidación de la metionina y carbamidometilación de la cisteína, y un corte fallido para la tripsina. Se estableció el espectro de 17 proteínas en anaerobiosis y 9 proteínas en aerobiosis. Se destacan la expresión aumentada en anaerobiosis de proteínas que participan en la síntesis-degradación del peptidoglicano (PG) y la diferenciación de proteínas involucradas en el metabolismo. En aerobiosis habría un aumento significativo de la expresión del componente B de la γ-hemolisina, proteína asociada a la virulencia de este microorganismo. El hallazgo del aumento en anaerobiosis en la síntesis de proteínas involucradas en la degradación de PG pone en duda el efecto beneficioso de los antibióticos β-lactámicos en casos de osteomielitis; asimismo la producción del componente B de la γ-hemolisina en aerobiosis estaría a favor de la utilización de antimicrobianos que inhiben la síntesis proteica. Se necesitan ensayos adicionales con agregado de dosis sub-inhibitorias de β-lactámicos y de antimicrobianos que inhiben la síntesis proteica para seguir avanzando en el conocimiento de los mecanismos participantes en la patogenia de los procesos causados por este agente y de la utilidad de los distintos antibióticos.