XXI ALAM
Resumo:1178-2


Prêmio
1178-2Expresión de determinantes de virulencia y resistencia bacteriana en Escherichia coli Shigatoxigénica bajo la influencia de compuestos coloidales de bismuto.
Autores:Julia Di Paolo (FBIOYF - Facultad de Ciencias Bioquimicas UNR) ; Virginia Aquili (FBIOYF - Facultad de Ciencias Bioquimicas UNR) ; Cecilia Casabonne (FBIOYF - Facultad de Ciencias Bioquimicas UNR) ; Tomas Subils (FBIOYF - Facultad de Ciencias Bioquimicas UNR) ; David Tomat (FBIOYF - Facultad de Ciencias Bioquimicas UNR) ; Ignacio Bolognino (FBIOYF - Facultad de Ciencias Bioquimicas UNR) ; Claudia Balague (FBIOYF - Facultad de Ciencias Bioquimicas UNR)

Resumo

Escherichia coli (EC) productor de toxinas Shiga (STEC) es un patógeno gastrointestinal emergente que puede producir una amplia variedad de enfermedades como diarreas autolimitadas hasta colitis hemorrágica. La expresión de determinantes de virulencia como adhesinas, adherencia inespecífica por hidrofobicidad superficial, fimbrias y toxinas puede ser modificada por diferentes compuestos químicos, antimicrobianos y otros fármacos, como los ariloxoalcanoicos que inducen la expresión del operon mar (múltiple antibiótico resistencia) y simultáneamente reducen la capacidad de adherencia bacteriana en EC. El objetivo de este trabajo fue determinar si compuestos coloidales de bismuto (CCB), usados como antidiarreicos, pueden reducir la patogenicidad de STEC y evaluar su relación con la múltiple resistencia a antibióticos. Se utilizaron 10 aislamientos de STEC de origen fecal y alimentos y como controles EC AG100, ATCC 43895, AG112, CFAI y HB101. Se evaluó el efecto de ¼ de la CIM de CCB sobre la CIM de cloranfenicol, ciprofloxacina y tetraciclina. Los sistemas de eflujo activo fueron evidenciados utilizando carbonyl cianuro m-clorofenihidrazona (CCCP). La expresión de porinas fue analizada por SDS-PAGE. Se analizó y cuantificó por Real Time PCR la expresión de los genes acrA, acrB y marA en presencia y ausencia de CCB. Se utilizó el método 2-∆∆Ct para la cuantificación génica relativa. La expresión de fimbrias y adhesinas se evidenció mediante reacciones de hemoaglutinación y la hidrofobicidad superficial se ensayó mediante el método de “Salting out” con diluciones seriadas de una solución de (NH4)2SO4. Se observó que CCB a la concentración ensayada incrementan la CIM de los antimicrobianos testados, la sensibilidad de dichos antibióticos se incrementó de 2 a 4 veces en presencia de CCCP, la expresión de la porina OmpF se vio disminuída en el SDS-PAGE, y se observó un marcado incremento en la expresión de acrA, acrB y marA respecto de las cepas sin inducir. Dichos resultados proponen a CCB como inductores del fenotipo de múltiple resistencia a antimicrobianos. Sin embargo se evidenció que dichos compuestos suprimen la hemoaglutinación en las cepas estudiadas y disminuyen la hidrofobicidad superficial, por lo que podemos concluir que este compuesto puede reducir los primeros eventos del proceso infeccioso como capacidad de adherencia de aislamientos de STEC.


Palavras-chave:  adherencia, Bismuto, Escherichia coli, operon mar