Resumo

Candida albicans é um patógeno oportunista e é a quarta principal causa de infecções nosocomiais. As proteínas ancoradas por glicosilfosfatidilinositol (GPI) são um dos principais fatores de virulência em C. albicans. A identificação e caracterização de novas proteínas-GPI pode colaborar para o entendimento da infecção e auxiliar o desenvolvimento de novos tratamentos. Neste trabalho avaliamos a expressão de PGA13, PGA55 e PGA58 sob diferentes estresses em células de linhagem selvagem e nocaute para o gene HOG1, um regulador central de resposta por estresse em C. albicans. Células das linhagens SC5314 (selvagem) e hog1Δ/hog1Δ na fase exponencial de crescimento foram submetidas a diferentes estresses: 42^oC, NaCl (1,5M), sorbitol (1,5M), pH (2,6 e 10,5), H₂O₂ (5mM), etanol (10%), cafeína (15mM), fluconazol (100μM), SDS (0,05%) e calcofluor (20μM) por 1 e 5 horas. A expressão dos genes de interesse foi analisada por PCR em tempo real. Em células selvagens de C. albicans, a expressão da PGA13 foi induzida após a exposição de 1h em meio com pH 10,5 (7,1 X) e SDS (3,8 X), e apresentou níveis maiores de RNA após 5h de exposição a 42^oC (16 X), NaCl (15 X), pH 10,5 (5,4 X), H₂O₂ (9,4 X), cafeína (9,1 X) e calcofluor (41 X) quando comparados aos níveis de RNA de células mantidas a 30^oC. Níveis maiores de RNA de PGA13 em células hog1Δ/hog1Δ foram detectados após 1h de exposição a 42^oC (6,5 X), NaCl (8,7 X), sorbitol (4,1 X), pH 2,6 (7,8 X), etanol (5,1 X) e SDS (4,1 X) quando comparados a células selvagens nas mesmas condições de estresse. A expressão da PGA55 em células selvagens foi induzida após a exposição de 1h em meio com pH 10,5 (4 X) e H₂O₂ (4,4 X), e níveis mais elevados de RNA foram detectados em células hog1Δ/hog1Δ a 42^oC (4 X) e pH 2,6 (2,3 X) comparados a 30^oC. A expressão da PGA58 foi consideravelmente aumentada em quase todas as condições de estresse analisadas (exceto fluconazole) após 1h e 5h de exposição em células selvagens de C. albicans. A expressão de PGA58 em células hog1Δ/hog1Δ foi aumentada em todas as condições de estresse inclusive células cultivadas a 30^oC. Os resultados obtidos sugerem que a resposta adaptativa de C. albicans a diferentes estresses envolve o aumento ou diminuição da expressão de PGA13, PGA55 e PGA58, e que o gene HOG1 está envolvido no controle da expressão destes genes nestas condições.