Resumo

Introducción y Objetivos. Dos tipos de aislamientos de Staphylococcus aureus resistente a meticilina (SARM) han sido establecidos, los de genotipo hospitalario (GH) y comunitario (GC). Estos últimos han adquirido componentes genéticos específicos que los hacen más patogénicos. Nuestro objetivo fue diseñar y estandarizar un macroarreglo de ADN para detectar y caracterizar aislamientos SARM-GC. Materiales y métodos. A partir de un análisis genómico comparativo de los genomas de S. aureus secuenciados utilizando el programa BLASTCLUST se identificaron marcadores moleculares específicos para los principales clones SARM-AC y SARM-AH en nuestra región. Cinco de estos nuevos marcadores, mas 15 genes previamente reportados, fueron utilizados para construir un macroarreglo de ADN para detectar rápidamente aislamientos SARM-GH. La detección de los genes se realizó por quimioluminiscencia. Se evaluó la especificidad de la técnica con 10 aislamientos clínicos previamente caracterizados. Los clones USA300, Chileno y brasilero fueron usados como control. Resultados. Los análisis genómicos comparativos permitieron encontrar 183 posibles nuevos marcadores moleculares, de los cuales 156 y 27 fueron específicos para aislamientos SARM-GC y SARM-GH, respectivamente. Se diseñó y estandarizó una técnica molecular basada en macroarreglos de ADN con la cual es posible detectar rápida y simultáneamente 20 genes específicos para SARM-GC y SARM-GH. La cantidad de ADN mínima que detecta la técnica fue de 200ng. La especificidad del ensayo fue del 100%. Conclusiones. El uso de este macroarreglo con los 20 genes permite identificar un aislamiento SARM-GC de manera rápida y específica; adicionalmente permite establecer la presencia de varios genes que codifican para factores de patogenicidad de relevancia clínica en S. aureus. Experimentalmente se confirmó que los cinco genes nuevos encontrados “in silico” fueron útiles para la diferenciación de SARM-GC y SARM-GH. Este trabajo fue financiado por COLCIENCIAS código 130849326155.