Resumo

Introducción: El flagelo bacteriano es un factor importante en la inducción de una respuesta inflamatoria intestinal en las infecciones por Salmonella y otros patógenos entéricos. Se postula que esta respuesta es relevante para mantener la infección localizada a nivel intestinal en infecciones humanas. Serotipos como Dublin (S. Dublin) son poco prevalentes entre los casos clínicos pero presentan índices de invasividad muy elevados. Previamente reportamos que varios aislamientos nacionales de S. Dublin obtenidos de casos de enfermedad invasiva son inmóviles por carecer de flagelina. Sin embargo, no hallamos diferencias en la secuencia de los genes reguladores de la expresión de genes flagelares entre cepas móviles e inmóviles. En este trabajo nos propusimos descifrar los determinantes moleculares responsables de este fenotipo aflagelado. Materiales y métodos: Los niveles de expresión de los genes flagelares fueron evaluados por Real Time-PCR cuantitativo a partir de cultivos bacterianos en fase exponencial. La localización y niveles celulares del factor Sigma flagelar FliA (activador transcripcional de genes de clase 3) y del factor anti-Sigma FlgM, se analizaron mediante Western blot, usando anticuerpos específicos obtenidos en el laboratorio. Los genomas completos de los aislamientos fueron secuenciados usando la tecnología Illumina. Comparamos las secuencias completas de las regiones flagelares con la herramienta Bioedit. Resultados: Los aislamientos aflagelados presentan inhibida la expresión de genes de clase 3 (entre los que se encuentra fliC o flagelina), respecto a los aislamientos móviles. Además, FlgM no se secreta en las cepas aflageladas por lo que permanecería unido a FliA, inhibiéndolo. Al comparar las secuencias de las regiones flagelares detectamos una deleción de 42 bases en el gen fliE en todas las cepas inmóviles. FliE se localiza en el cuerpo basal del flagelo, integrando el sistema de secreción tipo III flagelar. Conclusiones: El fenotipo aflagelado observado en ciertos aislamientos invasivos de S. Dublin se debe a una inhibición de la expresión de los genes flagelares de clase 3. Esta inhibición es consecuencia de niveles citosólicos aumentados de FlgM en estos aislamientos, lo cual probablemente se deba a una menor secreción de la misma por la presencia de una proteína FliE delecionada. La confirmación de esta hipótesis está en proceso.