XXI ALAM
Resumo:1019-1


Poster (Painel)
1019-1Identificação rápida e acurada de espécies fúngicas por MALDI-TOF em isolados clínicos
Autores:Marilena Martins Anjos (IAL - Instituto Adolfo Lutz) ; Sandra Regina Stolf Brasil Pukinskas (IAL - Instituto Adolfo Lutz) ; Daise Damaris Carnietto de Hippolito (IAL - Instituto Adolfo Lutz) ; Juliana Possatto Takahashi (IAL - Instituto Adolfo Lutz) ; Maria Walderez Szeszs (IAL - Instituto Adolfo Lutz) ; Dulcilena de Matos Castro E Silva (IAL - Instituto Adolfo Lutz) ; Marcia Souza Carvalho Melhem (IAL - Instituto Adolfo Lutz)

Resumo

Cada vez mais, a identificação do agente infeccioso é crucial para adequado manejo do paciente. MALDI-TOF é uma tecnologia que utiliza a desorção a laser por ionização de proteínas e calcula a massa molecular pelo tempo de vôo das partículas, proporcionando diagnóstico rápido e confiável na identificação dos agentes infecciosos. Este estudo teve como objetivo identificar pela metodologia de MALDI-TOF, isolados clínicos que fazem parte de uma coleção de culturas de fungos de interesse médico. Para tal, foram utilizados 109 isolados de leveduras e 10 de fungos filamentosos, todos de origem clínica. Na fase pré-analítica os isolados foram processados de acordo com protocolo proposto pelo fabricante (Becton Dickinson, EUA). As análises foram feitas em triplicata e dois spots da placa metálica foram utilizados como controle (E. coli) interno de qualidade. As culturas de fungos filamentosos foram realizadas à temperatura ambiente, em caldo Sabouraud, durante 5 dias, sob agitação constante. Após centrifugação (13.200/2’), o sedimento foi aplicado em 3 spots da placa metálica. Dentre as espécies crípticas, C. orthopsilosis (n=5), C. metapsilosis (n=8), C. parapsilosis stricto sensu (n=14) e C. dubliniensis (n=1) foram identificadas corretamente. Foram, também, diferenciadas espécies correlatas, fenotipicamente, como: C. neoformans (n=7) e C. gattii (n=12), C. krusei, C. norvegensis e C. inconspícua. Espécies raras (C. lypolitica, C. famata, C. norvegensis, C. kefyr, C. intermedia, C. haemulonii, C. lusitaniae, Loderomyces elongisporus, C. pararugosa, C. palmiolephila, Geotrichum candidum e Cryptococcus uniguttulatus) foram, acuradamente, classificadas. Cinco isolados de C. haemuloniii apresentaram resultados corretos. Apenas para 5 isolados, C. lusitaniae (n=2), C. inconspícua (n=1), Rhizopus spp. (n=1) e Exophiala spp. não foram obtidos resultados, talvez pela ausência de informação na base de dados de tais espécies ou dificuldades metodológicas. Dentre os fungos filamentosos, o método foi capaz de identificar: Sporothrix schenckii, Aspergillus fumigatus, A. niger, A. orizae, Exophiala dermatitidis, Microsporum canis e Trichophyton rubrum. A liberação rápida de resultados (2 h) é uma das grandes vantagens da metodologia de MALTI-TOF que apresentou, neste estudo, excelente desempenho para identificação de leveduras e fungos filamentosos de grande importância em infecções muco-cutâneas e invasivas.


Palavras-chave:  Identificação, Leveduras, MALDi-TOF