Resumo

El proceso infectivo de Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) involucra la adaptación a diversos cambios medioambientales en el hospedero, tales como variaciones de pH, temperatura, y exposición a antibióticos, entre otros. Los sistemas de dos componentes (TCS) permiten a S. Typhimurium y otras bacterias responder a estos cambios. En nuestro laboratorio se caracterizó el TCS BaeSR de S. Typhimurium y se demostró su participación en la respuesta a ciprofloxacino. Por otro lado, se ha demostrado que los antibióticos bactericidas aumentan la generación de especies reactivas de oxigeno (ROS). El anión superóxido es el primer ROS que se genera y dismuta espontánea y enzimáticamente a peróxido de hidrogeno. Las enzimas responsables de dismutar este anión son las superóxido dismutasas (SOD). En S. Typhimurium se conocen 3 tipos de SOD, SodA, SodB y SodC. El objetivo de este trabajo es demostrar que el TCS BaeSR de S. Typhimurium participa en la modulación de las superóxido dismutasas frente a ciprofloxacino. En primera instancia se realizó una medición de la actividad SOD en la cepa silvestre y ΔbaeSR frente a ciprofloxacino, donde se obtuvo un aumento de la actividad de SodA y SodB solo en la cepa silvestre. Mediante actividad β-galactosidasa de los promotores de sodA y sodB se observó que, frente a ciprofloxacino, sodA aumenta significativamente su actividad solo en la cepa silvestre, en tanto, sodB aumenta pero en la cepa ΔbaeSR . Por medio de qRT-PCR se observó que sodA se induce de manera SoxS-independiente y sodB, a diferencia de lo obtenido en la actividad β-galactosidasa, se induce en la cepa silvestre. Por ultimo, analisis bioinformaticos revelaron que el promotor de sodA tendría 2 de sitios de unión a BaeR y uno en el promotor de sodB. Ensayos del cambio en la movilidad electroforética demostraron que BaeR solo se une al promotor del gen sodA in vitro. Estos resultados sugieren que el TCS BaeSR frente a ciprofloxacino, modula positivamente la expresión de sodA y negativamente la expresión de sodB. Además la modulación sobre sodA seria de forma directa. Financiamiento: FONDECYT Nº11100142, DI-UNAB 15-12/R.