XXI ALAM
Resumo:995-1


Poster (Painel)
995-1Detecção de Ureaplasma spp. em muco vulvovaginal de vacas de aptidão leiteira no agreste de Pernambuco, Brasil.
Autores:André da Rocha Mota (UFRPE - UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL PERNAMBUCO) ; Bruno Henrique Leal E Silva Alves (UFRPE - UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL PERNAMBUCO) ; José Givanildo da Silva (UFRPE - UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL PERNAMBUCO) ; Júnior Mário Baltazar de Oliveira (UFRPE - UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL PERNAMBUCO) ; Maria Lydia de Freitas Viégas (UFRPE - UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL PERNAMBUCO) ; Sandra Batista dos Santos (UFRPE - UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL PERNAMBUCO) ; José Wilton Pinheiro Júnior (UFRPE - UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL PERNAMBUCO) ; Rinaldo Aparecido Mota (UFRPE - UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL PERNAMBUCO)

Resumo

Bactérias da família Mycoplasmataceae têm sido isoladas do trato genital de bovinos, podendo ou não causar distúrbios reprodutivos, nestes casos, determinam perdas na performance reprodutiva dos animais. O objetivo deste estudo foi detectar o DNA de Ureaplasma spp. através da PCR e realizar o isolamento desse molicute em amostras de muco vaginal de vacas com aptidão leiteira. Foram processadas para o isolamento e PCR 50 suabes vaginais de vacas oriundas de cinco propriedades. Após a coleta os suabes foram armazenados em tubos falcon estéreis, contendo 3mL de solução de PBS (pH 7,2) e foram encaminhados ao Laboratório de Doenças Infectocontagiosas da UFRPE, sob refrigeração a 4ºC. As amostras foram submetidas à extração de DNA com kit comercial, utilizando-se o protocolo do fabricante. A PCR para detecção de Ureaplasma spp., foi realizada com os oligonucleotídeos UGP-F e UGP-R com o perfil térmico padrão descrito previamente na literatura. A reação da PCR consistiu de um mix contendo: 5μL de DNA genômico, 30pmol de cada oligonucleotídeo (UGP-F’ e UGP-R’), 6,25μL de TopTaq Mastermix e água Mili-Q ultrapura. A cepa ATCC (GMU132), U. diversum foi utilizada como controle positivo. Para isolamento as amostras foram filtradas em holder contendo filtro milipore de 0,45µm, em seguida um volume de 100μL foi diluído de 10-1 até 10-5, sendo semeado em Meio “U”, caldo e placa, e incubados a 37ºC sob microaerofilia, por no mínimo 21 dias, e as placas foram examinadas semanalmente em microscópio estereoscópico 80X. Nos dois métodos usados para a detecção do agente foi observada uma frequência de 4% (2/50) para Ureaplasma spp. A partir dos resultados encontrados conclui-se que Ureaplasma spp. está presente nos rebanhos estudados, sendo necessária a adoção de medidas preventivas que diminuam os prejuízos a sanidade e a produção ocasionados pela infecção por tal agente.


Palavras-chave:  Ureaplasma spp, PCR, bovinos, micoplasmoses