XXI ALAM
Resumo:970-1


Poster (Painel)
970-1Efeito do Quorum Sensing na expressão dos genes mot A, mot B e fli C em Salmonella Typhimurium
Autores:Rita de Cássia dos Santos da Conceição (UFPEL - Universidade Federal de Pelotas) ; Jéssica Lopes Borchardt (UFPEL - Universidade Federal de Pelotas) ; Régis Tuchtenhagen Sturbelle (UFPEL - Universidade Federal de Pelotas) ; Claúdio Dias Timm (UFPEL - Universidade Federal de Pelotas) ; Fábio Pereira Leivas Leite (UFPEL - Universidade Federal de Pelotas)

Resumo

Bactérias do gênero Salmonella estão entre os principais micro-organismos patogênicos veiculados por alimentos. A patogenicidade desta bactéria está relacionada a uma série de fatores de virulência e dentre estes podemos citar os flagelos. A expressão do flagelo está entre os fatores de virulência modulados por Quorum Sensing. Quorum Sensing é um sistema de sinalização entre as bactérias, através de moléculas denominadas de auto-indutores. Quando estes atingem uma determinada concentração em decorrência do aumento da densidade celular, a bactéria os detecta e responde alterando a sua expressão gênica. Adrenalina e noradrenalina são catecolaminas produzidas pelos mamíferos para comunicação celular, sendo liberadas pelo sistema nervoso simpático, encontradas no trato gastrointestinal e podem servir como moléculas sinais ativando/reprimindo a expressão gênica do hospedeiro e dos micro-organismos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a expressão dos genes envolvidos na montagem e funcionalidade do flagelo(mot A, mot B e fli C) quando Salmonella enterica sorovar Typhimurium (ST) foi exposta a adrenalina e auto-indutores através do uso do meio condicionado. ST foi cultivada em meio Essencial Mínimo (MEM) a 37o C por 7 horas a 130 rpm em agitador orbital. Após este período, centrifugado por 13000 g por 10 minutos e o pellet utilizado para inocular o meio MEM (controle) e QS (50% de mc + 500 µM de adrenalina). Amostras foram coletadas a cada trinta minutos, totalizando quatro coletas. Estas foram centrifugadas e o pellet tratado com Trizol. O RNA total foi extraído e a síntese de cDNA realizada utilizando o kit High Capacity cDNA Reverse Transcription e estocado a -20o C até sua utilização. A partir da obtenção destes foi realizado um PCR quantitativo (qPCR) para verificar a expressão dos genes mot A, mot B e fli C. O gene 16 S rRNA foi usado como controle interno da reação. Observamos que os genes mot A, mot B e fli C, tiveram um aumento na sua expressão no meio MEM após duas horas de incubação a 37o C, aumentando a expressão do gene mot A em torno de 16 vezes em relação ao controle. A exposição à adrenalina e ao meio condicionado induziu a uma maior expressão dos genes envolvidos com a função rotora do flagelo. Estudos ainda serão realizados para melhor entender a relação patógeno – hospedeiro.


Palavras-chave:  Auto indutores, Quorum sensing, Salmonella Typhimurium