Resumo

A tuberculose (TB) é uma doença crônica causada por bacilos pertencentes ao complexo Mycobacterium tuberculosis. Apesar de quase ter sido erradicada em países desenvolvidos, a TB continua sendo um importante problema de saúde pública, principalmente em países em desenvolvimento. A Pirazinamida (PZA) é uma droga importante que em combinação com a isoniazida (INH), rifampicina (RMP) e etambutol (EMB) é usada no tratamento para a tuberculose no esquema recomendado pela Organização Mundial de Saúde (OMS). O teste de sensibilidade in vitro disponível para PZA apresenta dificuldades de execução, devido ao pH ácido do meio necessário para a ativação da PZA. O objetivo do presente estudo foi avaliar metodologias rápidas para determinação da susceptibilidade in vitro da pirazinamida (PZA) em Mycobacterium tuberculosis. Foram estudados cepas de referência de M. tuberculosis H37Rv com sensibilidade à PZA e Mycobacterium bovis AN5 com resistência à PZA e 30 isolados clínicos de M. Tuberculosis (6 resistentes e 24 sensiveis à PZA) utilizando os métodos da concentração absoluta em Lowenstein-Jensen (LJ), teste de susceptibilidade pela observação microscópica (MODS), técnica em microplaca utilizando Resazurina como agente revelador (REMA) pH 6,0 e REMA pH 5,5. Dentre os 30 isolados, seis se mostraram resistentes e 24 sensíveis à PZA pelos quatro métodos testados. A maioria dos isolados resistentes apresentaram concentração inibitória mínima (CIM)>3200µg/ml para os métodos MODS, REMA pH 5,5 e REMA pH 6,0 e ≥800µg/ml para LJ. Os isolados sensíveis apresentaram CIM ≤ 50µg/ml para o método REMA pH 5,5 e CIM ≤ 100µg/ml para os outros três métodos testados. Os métodos MODS, REMA pH 5,5, REMA pH 6,0 e LJ forneceram resultados em media com 6, 8, 8 e 28 dias, respectivamente. Todos os métodos apresentaram 100% de concordância quando comparado com o método da concentração absoluta em LJ. Os métodos MODS, REMA pH 5,5 e REMA pH 6,0 parecem ser uma alternativa viável para a determinação da susceptibilidade in vitro da PZA em Mycobacterium tuberculosis por serem rápidos, eficientes, de fácil implantação e interpretação laboratorial.