Resumo

Introducción. Los explosivos son contaminantes xenobióticos que constituyen un riesgo para la salud dado que algunos son tóxicos y carcinogénicos. Entre los más energéticos y recalcitrantes se encuentra el pentaeritritol tetranitrato (PETN) ya que presenta enlaces nitroésteres de difícil degradación. En vista que este explosivo es ampliamente usado en el Perú en el presente estudio se evaluó la capacidad degradativa de PETN por bacterias aisladas de ambientes mineros. Materiales y Métodos. Se evaluó 19 cepas aisladas de ambientes mineros de las regiones La Libertad, Junín y Lima. En primer lugar se seleccionaron las cepas con mayor crecimiento (DO600) en caldo mínimo PETN pH 7.2 a 28°C y cultivadas a 200 rpm, y se realizaron dos subcultivos en las mismas condiciones. Luego, se realizó la cinética de degradación de las cepas seleccionadas en caldo PETN con Tween 80 al 0.1% para la cuantificación de PETN residual y las proteínas totales mediante espectrofotometría. A continuación, se ensayó la actividad PETN reductasa en extractos crudos mediante la cuantificación espectrofotométrica de nitritos liberados y/o oxidación del cofactor NADPH. Finalmente, las cepas con mayor eficiencia de degradación de PETN fueron identificadas mediante análisis del gen rRNA 16S. Resultados y Análisis. Se identificó a las cepas J8A2 y M1B como Bacillus sp. y Enterobacter sp., respectivamente. La cinética de degradación mostró una velocidad específica de crecimiento de 0.057 h-1 para J8A2 y 0.042 h-1para M1B; y una velocidad específica de degradación de 0.72 mmol de PETN/g de proteína.h y 1.16mmol de PETN/g de proteína.h, respectivamente. Esta última es muy similar a la reportada para Enterobacter cloacae PB2 de 1.03 mmol de PETN/g de proteína.h. Además, los ensayos de actividad enzimática de la cepa J8A2 evidenciaron que se requiere de una molécula de NADPH para liberar una molécula de nitrito, como fue reportado para E. cloacae PB2; y presentó una actividad específica (U) de 1.03 mmol de PETN/h y una actividad específica por proteína (U/g) de 138.6 mmol de PETN/g.h. Conclusiones. Se demostró la presencia de bacterias degradadoras de PETN en ambientes mineros con potencial de ser empleadas en procesos de biorremediación. Entre éstas se identificó a la cepa J8A2 como Bacillus sp. cuya actividad enzimática sobre PETN es dependiente de NADPH.