XXI ALAM
Resumo:874-1


Poster (Painel)
874-1Caracterização da diversidade de isolados de Bacillus através de sequenciamento do gene 16S rRNA provenientes do processo de compostagem da Fundação Parque Zoológico de São Paulo.
Autores:Maíra Rodrigues Nascimento (UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo / FPZSP - Fundação Parque Zoológico de São Paulo) ; Luiz Juliano (UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo / FPZSP - Fundação Parque Zoológico de São Paulo) ; Suzan Pantaroto de Vasconcellos (UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo / FPZSP - Fundação Parque Zoológico de São Paulo) ; Bruna Nunes Buscariollo (UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo / FPZSP - Fundação Parque Zoológico de São Paulo) ; Rafael Costa Santos Rocha (UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo / FPZSP - Fundação Parque Zoológico de São Paulo) ; João Batista da Cruz (FPZSP - Fundação Parque Zoológico de São Paulo) ; Patrícia Locosque Ramos (UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo / FPZSP - Fundação Parque Zoológico de São Paulo)

Resumo

Introdução - A diversidade de bactérias isoladas de três fases do processo de compostagem da Fundação Parque Zoológico de São Paulo (FPZSP) foi estudada e onze gêneros foram identificados pelo gene 16S rRNA, sendo que gênero Bacillus foi o mais encontrado. Geograficamente, o parque está localizado em uma área de 824,529 metros quadrados de Mata Atlântica nativa, considerado um dos mais ricos biomas do mundo. Material e Métodos - As amostras foram coletadas na FPZSP a partir de células em concreto fechada por tábuas de madeira onde as camadas de substrato são depositadas. Foram utilizadas 10 g do material e posteriormente pesados e diluídos em 90 ml de água estéril. Foram feitas diluições seriadas (10-2; 10-4 e 10-6), as quais foram espalhadas em placas de Petri em nove meios de cultura diferentes seguido por incubação em estufa BOD em três temperaturas (30 ° C, 37 ° C e 45 ° C). Após 24 a 48 horas de incubação, as colônias bacterianas foram isoladas de acordo com as suas características macroscópicas e transferidas para placas de meio sólido. As bactérias isoladas foram verificadas quanto à pureza pela coloração de Gram. Todas as bactérias isoladas estão preservadas pelo método de ultracongelamento (-80C°). O DNA genômico foi extraído utilizando o kit “Wizard Genomic DNA Purification”, catálogo número # A1120, (Promega, Madison, WI, EUA:. Cat. A 1120), de acordo com as instruções do fabricante. Após a extração, as amostras selecionadas foram submetidas à análise de sequenciamento do gene 16S rRNA. Essas sequências foram comparados com sequências bacterianas depositadas no GenBank, onde sequências com elevada homologia foram recuperadas e alinhadas utilizando CLUSTAL W e MEGA 5,05 (http://www.megasoftware.net). As árvores filogenéticas foram construídas utilizando o método de Neighbor-Joining. Resultados: Dos 270 isolados de bactérias submetidos ao sequenciamento do gene 16S rRNA, 140 foram identificados como pertencendo ao gênero Bacillus (51%). Conclusões: Este estudo serviu para identificar a diversidade microbiológica da unidade de compostagem da FPZSP e confirmar que o gênero Bacillus pode ser predominante sobre este tipo de nicho, no qual as altas temperaturas encontradas selecionam esses microrganismos. Além disso, é possível vislumbrar a possibilidade de identificação de novas espécies bacterianas pertencentes ao gênero.


Palavras-chave:  Bacillus, Compostagem, 16S rRNA, diversidade, PCR