XXI ALAM
Resumo:824-2


Poster (Painel)
824-2DETECÇÃO E EXPRESSÃO DOS GENES DA HEMOLISINA HpmA EM ISOLADOS UROPATOGÊNICOS DE Proteus mirabilis
Autores:Marilucia Santos Ludovico (UEL - Universidade Estadual de Londrina - PR) ; Silvia Emanuelle Cestari (UEL - Universidade Estadual de Londrina - PR) ; Sérgio Paulo Dejato da Rocha (UEL - Universidade Estadual de Londrina - PR) ; Waldir Pereira Elias (IB - Instituto Butantan - São Paulo - SP) ; Jacinta Sanches Pelayo (UEL - Universidade Estadual de Londrina - PR)

Resumo

Proteus mirabilis é um bacilo gram-negativo, dimórfico, capaz de diferenciar-se entre uma célula vegetativa swimmer a uma hiper-flagelada swarmer. É um agente de infecções do trato urinário, podendo ser de difícil tratamento, com bacteremia persistente, própria de complicações associadas à cistite, pielonefrite aguda e crônica e formação de cálculos na bexiga e rins, principalmente entre indivíduos com anomalias do trato urogenital, pacientes com cateter de demora e idosos. P. mirabilis produz uma hemolisina a HpmA, associada a célula, cálcio independente, formadora de poro, codificada por dois genes hpmA e hpmB, que aumenta a patogenicidade deste microrganismo e por esta bactéria ser persistente, sua identificação no inicio da infecção se torna importante para o tratamento. Um total de 213 isolados de P. mirabilis uropatogênicos, foram analisados para detectar a presença dos genes hpmA e hpmB por PCR e dot blot. A detecção do gene hlyA foi realizada somente pela PCR. A expressão dos genes hpmA e hpmB foi verificada por RT–PCR. A atividade citotóxica foi verificada através do teste de hemólise em hemácias lavadas de carneiro e cultura de células Vero. Dois isolados de P. mirabilis foram parcialmente sequenciados para os genes hpmA e hpmB. Dos 213 isolados, em 205 (96,24%), foram confirmadas a presença dos genes hpmA e hpmB e nenhum apresentou o gene hlyA pela PCR. O dot blot confirmou a presença dos genes hpmA e hpmB, nos isolados que foram negativos pela PCR, exceto em um isolado. Os genes hpmA e hpmB dos isolados que foram sequenciados apresentaram 98% de identidade cada com os mesmos genes da amostra P. mirabilis HI4320. A atividade hemolítica foi observada em 130 (61,03%) dos isolados. A cultura bacteriana de 154 (72,3%) isolados apresentou efeito citotóxico em células Vero. A presença dos genes hpmA e hpmB foi predominante nos isolados. Este estudo mostra a detecção dos genes hpmA e hpmB pela PCR, como uma técnica rápida no diagnóstico para Proteus mirabilis.


Palavras-chave:  Proteus mirabilis, uropatogênico, hemolisina, Dot Blot, RT-PCR