XXI ALAM
Resumo:704-1


Poster (Painel)
704-1Estudo preliminar da susceptibilidade de Corynebacterium pseudotuberculosis em resposta ao estresse nitrosativo
Autores:Wanderson Marques Silva (UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais) ; Rodrigo Dias Oliveira Carvalho (UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais) ; Thiago Luiz de Paula Castro (UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais) ; Núbia Seyffert (UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais) ; Anne Cybelle Pinto (UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais) ; Luis Gustavo Carvalho Pacheco (UFBA - Universidade Federal da Bahia) ; Fernanda Alves Dorella (UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais) ; Alfonso Gala-garcía (UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais) ; Rachid El-aouar Filho (UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais) ; Camila Azevedo Antunes (UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais) ; Agenor Valadares Santos (UFPA - Universidade Federal do Pará) ; Artur Silva (UFPA - Universidade Federal do Pará) ; Anderson Miyoshi (UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais) ; Vasco Azevedo (UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais)

Resumo

Corynebacterium pseudotuberculosis é o agente etiológico da linfadenite caseosa (LC); uma doença infecto-contagiosa, crônica, que acomete pequenos ruminantes. Apesar do processo patogênico da enfermidade ser relativamente bem compreendido, pouco se sabe sobre os determinantes moleculares de virulência deste patógeno. Durante o processo infeccioso, C. pseudotuberculosis é exposta a uma gama de estresses, desde a entrada no hospedeiro, passagem pelo sistema linfático, até o estabelecimento nos órgãos. Os nichos nos quais o microrganismo sobrevive variam do ambiente aeróbico do ponto inicial de infecção, até a replicação intracelular em macrófagos. Isso implica na capacidade da bactéria de resistir a um ambiente extremamente hostil, com baixo pH, alta atividade proteolítica e grande potencial oxidativo. Assim, diversas proteínas são expressas para que a bactéria possa adaptar e sobreviver a este ambiente hostil. Dentro deste contexto, este trabalho visa avaliar a o proteoma de C. pseudotuberculosis em resposta ao estresse nitrosativo. Para avaliar a susceptibilidade de C. pseudotuberculosis sob a ação do agente gerador de estresse DETA/NO foi realizado curvas de crescimento. Após 1h de adição de DETA/NO a cultura foi centrifugada para obtenção do pellet bacteriano, para extração das proteínas totais da condição controle e estresse. Através do ensaio de curva de crescimento foi avaliada velocidade específica de crescimento e tempo de geração. A velocidade específica de crescimento bacteriano para linhagem 1002 Ct e 1002 DETA/NO foi de 0,249 e 0,137 unidades de absorbância por hora, respectivamente. E o tempo necessário para que C. pseudotuberculosis complete seu ciclo de duplicação é de 2,77h para 1002 Ct e 5,26h para a 1002 DETA/NO, demonstrando que quando submetida a esta condição de estresse, observa-se um atraso de aproximadamente 3h para que a 1002 DETA/NO realize um ciclo completo de duplicação em relação a 1002 Ct. O proteoma foi avaliado, utilizando eletroforese bidimensional e a avaliação preliminar possibilitou a detecção de 15 spots diferencialmente expressos entre a condição Controle e DETA/NO. Posteriormente será realizada espectrometria de massa para identificação destes spots proteicos, e assim avaliarmos que classes de proteínas estão sendo reguladas e desta forma compreendermos como C. pseudotuberculosis sobrevive em resposta ao estresse nitrosativo. Agencia fomento: CAPES,FAPEMIG e CNPq


Palavras-chave:  Corynebacterium pseudotuberculosis, proteoma, Resposta ao estresse, Estresse nitrosativo, Linfadenite Caseosa