XXI ALAM
Resumo:680-2


Poster (Painel)
680-2Identificação de antígenos para o diagnóstico da tuberculose por phage display.
Autores:Sebastião Marcos Tafuri Tafuri (UFU - Universidade Federal de Uberlândia / UFU - Escola Técnica de Saúde / UFU - Instituto de Genética e Bioquímica / UFU - Faculdade de Medicina da Universidade Federal de Uberlândia) ; Fabiana de Almeida Araújo Santos Santos (UFU - Universidade Federal de Uberlândia / UFU - Instituto de Genética e Bioquímica) ; Mayara Ingrid Sousa Lima Lima (UFU - Universidade Federal de Uberlândia / UFU - Instituto de Genética e Bioquímica) ; Léa Duarte da Silva Morais Morais (UFU - Universidade Federal de Uberlândia / UFU - Instituto de Genética e Bioquímica) ; André Luis de Moraes Carvalho Carvalho (PNCT/PMU - Programa Nacional de Controle da Tuberculose) ; Luiz Fernando Almeida Machado Machado (UFU - Universidade Federal de Uberlândia / UFU - Instituto de Genética e Bioquímica) ; Isabela Maria Bernardes Goulart Goulart (HC/UFU - Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia) ; Marcelo Simão Ferreira Ferreira (HC/UFU - Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia) ; Aércio Sebastião Borges Borges (HC/UFU - Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia) ; Luiz Ricardo Goulart Goulart (UFU - Universidade Federal de Uberlândia / UFU - Instituto de Genética e Bioquímica) ; Carlos Ueira-vieira Ueira-vieira (UFU - Universidade Federal de Uberlândia / UFU - Instituto de Genética e Bioquímica)

Resumo

A tuberculose é uma doença infectocontagiosa que representa um problema de saúde pública mundial. O grande desafio para seu controle está na correta identificação dos indivíduos com tuberculose ativa e bacilíferos, bem como aqueles que apresentam tuberculose infecção. Os métodos de diagnóstico para identificação do patógeno ainda apresentam baixa sensibilidade (65% a 85%). Justificando a necessidade da descoberta de novos antígenos mais sensíveis e específicos. Dessa forma, a metodologia de phage display, apresenta-se como uma ferramenta para desenvolver plataformas diagnósticas e vacinais, pois permite a seleção artificial de antígenos expostos na superfície de bacteriófagos. Para a realização deste trabalho foram incluídos indivíduos maiores de 18 anos, de ambos os sexos, com diagnóstico de acordo com OMS, atendidos no setor de Moléstias Infecciosas (HC/UFU) e nas Unidades de Saúde incluídas no Programa Nacional de Controle da Tuberculose de Uberlândia-MG. No processo de seleção (biopanning) utilizou-se uma biblioteca de fagos com 12 aminoácidos, tendo como alvo IgG purificada a partir de pool de soros de pacientes com tuberculose ativa, indivíduos contatos PPD positivo (PPD+) e PPD negativo (PPD-). Após três ciclos de seleção, o DNA dos fagos foi sequenciado e os aminoácidos deduzidos. Para o alinhamento dos peptídeos entre si e com proteínas específicas do MTB foram utilizados os programas CLUSTALW2 e PEPSURF, respectivamente. A reatividade dos 26 fagos selecionados foi avaliada por ELISA, sendo que 11 (24,44%) apresentaram maior reatividade com soros de indivíduos com tuberculose ativa e PPD+, quando comparado com indivíduos PPD-. Em analises in silico observou-se que a sequencia de um dos peptídeos possui similaridade com a proteína MPT64 imunodominante do complexo MTB, sendo que o alinhamento se deu em uma provável região antigênica. Esse mesmo fago apresentou maior sensibilidade para reconhecer anticorpos de pacientes com tuberculose ativa e indivíduos PPD+, sendo promissor para o diagnóstico imunológico da tuberculose. A metodologia de phage display apresentou-se como uma ferramenta importante no desenvolvimento de uma plataforma diagnóstica, permitindo a caracterização de mimetopos antigênicos para diferenciar tuberculose ativa da tuberculose infecção.


Palavras-chave:  Antigenos, Diagnóstico, IgG, Phage display, Tuberculose