XXI ALAM
Resumo:678-1


Prêmio
678-1PCR MULTIPLEX PARA RÁPIDA DETECÇÃO DE Staphylococcus spp. E DO GENE mecA DIRETAMENTE DE HEMOCULTURAS
Autores:Taisa Trevizani Rocchetti (UNESP - Universidade Estadual Júlio de Mesquita Filho) ; Katheryne Benini Martins (UNESP - Universidade Estadual Júlio de Mesquita Filho) ; Alessandro Lia Mondelli (UNESP - Universidade Estadual Júlio de Mesquita Filho) ; Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha (UNESP - Universidade Estadual Júlio de Mesquita Filho)

Resumo

Na ultima década houve uma mudança na etiologia das bacteremias, sendo que os Estafilococos coagulase negativa (ECN) se tornaram os primeiros agentes isolados. Um fator relevante envolvido na patogênese é a alta taxa de isolamento de Staphylococcus spp. resistente a oxacilina. A aplicação de técnicas de biologia molecular, entre elas PCR multiplex se mostrou uma técnica promissora devido a sua rapidez, acurácia e sensibilidade na obtenção dos resultados. Esse estudo objetivou a padronização de um multiplex PCR para a detecção de Staphylococcus spp. e resistência à oxacilina diretamente dos frascos de hemocultivo. Foram analisadas 371 amostras de hemoculturas obtidas de pacientes do HC da Faculdade de Medicina de Botucatu. Os microrganismos foram identificados por testes bioquímicos e simultaneamente o DNA bacteriano foi extraído diretamente dos frascos de hemoculturas para a amplificação por PCR multiplex do gênero Staphylococcus spp. e do gene mecA. Das 371 amostras estudadas foram isolados 85 (23,0%) S. aureus e 286 (77,0%) ECN. Dos ECNs 155 (54,2%) foram identificados como S. epidermidis, 50 (17,5%) S. warneri, 27 (9,4%) S. capitis, 26 (9,1%) S. haemolyticus, 7 S. xylosus, 6 S. simulans, 2 S. hominis, 2 S. caprae, 2 S. cohnii, 2 S. lugdunensis, 2 S. saprophyticus, 1 S. schleiferi, e concomitantemente 3 S. haemolyticus e S. warneri, e 1 S. hamemolyticus e S. epidermidis. Das 85 amostras de S. aureus 43 (50,6%) se mostraram resistentes no teste de disco difusão e 42 (97,7%) apresentaram o gene mecA e das 286 amostras de ECN 236 (82,5%) foram detectadas resistentes por esse método e 218 (92,4%) foram positivas para o gene mecA. A identificação fenotípica e a genotípica (PCR multiplex) mostrou 100% de concordância nas amostras onde foram isolados S. aureus e ECN. A única discordância foi quanto à detecção de resistência à oxacilina, sendo que em 19 amostras não foi detectado o gene mecA e estas amostras se mostraram resistentes no teste de suscetibilidade à oxacilina, podendo estar relacionado com outras formas de resistência desenvolvida pela espécie, como a hiperprodução de beta-lactamase ou modificação de outra PBP. O PCR multiplex se mostrou sensível, específico, rápido e com uma boa concordância com os resultados fenotípicos, podendo ser utilizado para a rápida detecção e tratamento adequado das bacteremias causadas por esses microrganismos.


Palavras-chave:  Hemocultura, mecA, PCR multiplex, Staphylococcus spp