Resumo

El análisis de la eficacia de una terapia inmunosupresiva o inmunoestimulante se puede estudiar mediante la linfoproliferación. Este estudio puede hacerse a nivel basal o analizando los efectos sobre la proliferación celular luego del estímulo mitogénico de linfocitos T con concanavalina A (ConA). El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del extracto de pared del probiótico Enterococcus faecalis CECT7121 (PEF7121) sobre células esplénicas de cultivo. Se emplearon lotes de ratones BALB/c (n=8) vírgenes y pre-tratados ig durante 3 días consecutivos con 0,2 mL de PEF7121. Dos días después de la última administración, los bazos de los animales de ambos grupos fueron extraídos y procesados en forma individual. Se utilizaron placas de poliestireno, colocando en cada pocillo 0,1 mL de la suspensión de las células esplénicas (4x10⁶ cel/mL) y luego 0,1 mL de las suspensiones de los extractos de pared. A los esplenocitos de los animales vírgenes se los estimuló con 2,01mg/mL de: a) PEF7121 b) extracto de pared de E. faecalis DS16 c) extracto de pared de E. faecalis ATCC51299 d) RPMI-C/10 % SFB. Los cultivos se realizaron por cuadriplicado a 37°C en presencia de 5 % CO2 durante 96 h. También las células de bazo de los animales vírgenes y pre-tratados con PEF7121 se incubaron en presencia de RPMI-C/10 % SFB y ConA (10 µg/mL) durante 48 h (37°C, 5 % CO2). Luego de 78 h se adicionó 1 µCi de [3H] Timidina y 18 h después se cosecharon las células y se midieron las cuentas por minuto de cada pocillo, con un contador de centelleo líquido. El estímulo de PEF7121 no indujo variación del nivel de proliferación de las células de bazo de los animales vírgenes respecto al basal. Se observó un incremento en el nivel de proliferación al cultivar los esplenocitos en presencia de los extractos de pared de E. faecalis DS16 y E. faecalis ATCC51299 (p<0,001, ANOVA). En ratones vírgenes, la capacidad proliferativa de los linfocitos T frente a ConA disminuyó cuando al mitógeno se le adicionó PEF7121 (p<0,001, ANOVA). Las células de bazo de los animales pre-tratados con PEF7121 mostraron una menor proliferación con ConA con respecto al grupo control (p<0,001, ANOVA). A diferencia de la pared de otras cepas de enterococos, PEF7121 no modifica la proliferación de las células esplénicas en cultivo, demostrando además un efecto antiinflamatorio.