Resumo

Antecedentes. Las cepas de EHEC son agentes causantes de colitis hemorrágica, el síndrome hemolítico urémico (SHU) y se asocian a un proceso inflamatorio en células intestinales. Diversos estudios han correlacionado la toxina Shiga, el flagelo y la intimina con altos niveles de citoquinas pro-inflamatorias. Sin embargo, la participación de otros factores, como la fimbria Lpf (Long polar fimbriae), una adhesina involucrada en la adherencia y colonización de EHEC a células intestinales no ha sido estudiado. Objetivo: Evaluar la participación de Lpf en la respuesta inflamatoria inducida por EHEC en células epiteliales intestinales en cultivo. Metodología. Se infectaron células intestinales T84 polarizadas y no polarizadas con cepas de referencia de EHEC 86-24 y sus mutantes isogénicas para lpf1, lpf2 o ambas. Se realizaron ensayos de cuantificación de la adhesión y se evaluó la secreción de IL-8. La expresión de genes que codifican para proteínas pro-inflamatorias se evaluó mediante ensayos de PCR array. Resultados. Se observó un número de bacterias adheridas similar en el caso de la doble mutante en relación a la cepa silvestre, pero menor para las mutantes individuales. Sin embargo, los ensayos de cuantificación de la secreción de IL-8, muestran una secreción significativamente mayor en células infectadas con la cepa silvestre de EHEC, comparada con sus mutantes individuales y la doble mutante. Los datos de PCR array evidencian una sobre-expresión de los genes que codifican a proteínas pro-inflamatorias, principalmente IL-8, ICAM-1 y CCL-20 en células infectadas con la cepa silvestre comparada con las mutantes isogénicas. Conclusión. Los resultados del presente trabajo sugieren la participación de la fimbria Lpf de EHEC en la inducción de respuesta inflamatoria en células epiteliales intestinales. Financiamiento. Fondecyt Nº 1120809