Resumo

INTRODUÇÃO: Streptococcus pneumoniae é um patógeno causador de diversas doenças graves como pneumonia, septicemia e meningite. A bactéria coloniza as vias respiratórias de indivíduos saudáveis e é transmitida pelo contato com secreções dos portadores. As doenças decorrem da invasão de sítios estéreis, onde o pneumococo se multiplica causando intensa resposta inflamatória. A importância da colonização como etapa inicial de todas as infecções pneumocócicas reforça a necessidade de se compreender as interações entre o patógeno e a mucosa respiratória. Um importante componente da imunidade inata nas mucosas é a lactoferrina (LF), uma proteína com atividades bactericida e bacteriostática contra diversas bactérias. Foi demonstrado que o pneumococo é capaz de ligar-se à LF, e a molécula responsável por essa interação é PspA, uma proteína exposta, que tem se mostrado imunogênica e protetora em diversos modelos animais. Através dessa ligação, a bactéria fica parcialmente protegida dos efeitos nocivos da LF. No entanto, PspA apresenta variabilidade estrutural, sendo classificada em 3 famílias e 6 clados, e o grau de reconhecimento cruzado entre moléculas é bastante variável. OBJETIVO: Avaliar o grau de susceptibilidade de pneumococos de diferentes sorotipos e clados de PspAs à ação da ALF in vitro, bem como o papel da adição de anticorpos anti-PspA e de PspAs recombinantes solúveis nessa interação. MÉTODO: Pneumococos foram cultivados e incubados na presença de LF em diferentes concentrações, com ou sem a adição de anticorpos anti-PspA ou fragmentos recombinantes de PspA clados 1 a 4. Diluições seriadas foram plaqueadas, e as bactérias contadas após 18 horas. RESULTADOS: Diferentes isolados de S. pneumoniae foram sensíveis à ação lítica da LF. A adição de rPspAs bloqueou a lise bacteriana por LF, enquanto anticorpos anti-PspA ampliaram os efeitos líticos de LF sobre a bactéria. CONCLUSÃO: Todos os isolados avaliados foram sensíveis à lactoferrina em graus variados. A adição de anticorpos anti-PspA foi capaz de aumentar a ação lítica da proteína sobre os isolados, possivelmente por bloquear os efeitos protetores de PspA. A adição de rPspAs foi capaz de bloquear competitivamente a ligação da LF à bactéria, impedindo assim sua ação lítica. Instituição de fomento: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP).