XXI ALAM
Resumo:350-1


Poster (Painel)
350-1Identificação molecular de Dengue vírus a partir de amostras clínicas por RT-PCR.
Autores:Vanessa de Sousa do Valle (PIBIC/UFPI - Universidade Federal do Piauí) ; Laís Sousa Santos (PPG BIOTEC/UFPI - Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia) ; Symonara Karina Medeiros Faustino (LACEN-PI - Laboratório Central de Saúde Pública) ; Anna Carolina Toledo da Cunha Pereira (PPG BIOTEC/UFPI - Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia) ; Gustavo Portela Ferreira (PPG BIOTEC/UFPI - Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia)

Resumo

Introdução: A dengue é a arbovirose mais prevalente no mundo. O Dengue vírus (DENV) possui quatro sorotipos (DENV1-4) epidemiologicamente relacionados, mas imuno e geneticamente distintos. Podem causar síndromes que vão de assintomáticas a letais, a Febre do Dengue (FD), mais comum, caracteriza-se por febre e cefaléia; a Febre Hemorrágica (FHD) e a Síndrome do Choque da Dengue (SCD), mais graves, caracterizam-se por hemorragia, plaquetopenia e extravasamento plasmático. O diagnóstico precoce é de fundamental importância para o monitoramento viral e a implementação terapêutica. Materiais e Métodos: Foram analisadas 44 amostras de soro sugestivas para o DENV representativas do estado do Piauí de 2011 a maio de 2012. O RNA viral foi extraído utilizando o protocolo do fabricante (kit Invisorb®) para conversão do RNA em cDNA e amplificação dos produtos pela técnica de RT-PCR, realizada conforme o método descrito por Lanciotti, 1992 e os produtos foram visualizados por eletroforese em gel de agarose. Discussão dos Resultados: As amostras foram coletadas, em média, no 2º dia após o início dos sintomas, correspondendo ao período de viremia. Das 44 amostras analisadas 5 (11,36%) foram positivas pela técnica de RT-PCR, as amostras positivas amplificaram um tamanho molecular de 511 pb, correspondente a região de interesse junto aos genes C/prM. Foram utilizados iniciadores capazes de se ligar a qualquer dos sorotipos virais e amplificar, portanto a presença de amplificação indica amostra positiva para o DENV independentemente do sorotipo. Trata-se de uma metodologia rápida e conclusiva que permiti a detecção do RNA viral em soros virêmicos. Embora não tenha sido realizada tipagem viral, sugerem-se os sorotipos DENV-1 e 2 circulantes, no estado do Piauí, em epidemias no período das análises. Conclusão: A análise molecular por RT-PCR é um método de alta sensibilidade e especificidade que proporciona a identificação do vírus em amostras clínicas, permitindo a diferenciação da dengue de outras síndromes com sintomatologia semelhante, além de contribuir para o monitoramento de circulação viral e para implementação preventiva junto à vigilância epidemiológica. Suporte Financeiro: FAPEPI/CNPq, CAPES, UFPI.


Palavras-chave:  Dengue, Amostras clínicas, RT-PCR