Resumo

O sisal (Agave sisalana Perrine) é uma cultura de grande importância econômica e social para a região semiárida do nordeste brasileiro. Embora, o nitrogênio seja essencial para o crescimento e desenvolvimento das plantas, o sisal vem sendo cultivado sem a utilização de fertilizantes nitrogenados, seja por adubos químicos ou orgânicos. As bactérias diazotróficas são capazes de fornecer nitrogênio para diversas culturas e desta forma promover o crescimento vegetal. Por este motivo o estudo da diversidade de bactérias diazotróficas associadas ao sisal é fundamental para a exploração do potencial destes microrganismos para o desenvolvimento de sistemas sustentáveis de cultivo do sisal. O objetivo deste trabalho foi avaliar a diversidade de isolados bacterianos diazotróficos associados ao sisal. Foram obtidos 48 isolados de bactérias, em meio de cultura livre de nitrogênio. O DNA desses isolados bacterianos foi extraído pelo método de fervura e centrifugação. Avaliou-se a presença do gene nifH utilizando um nested PCR com dois pares de primers (PolF/R e nifHF/R). Os isolados que foram positivos para o gene nifH, foram caracterizados pela amplificação da região BOX utilizando o primer BOX-A1R e o material amplificado foi analisado em gel de agarose 2%, 50V-300’. Em seguida, a região 16S rDNA dos isolados bacterianos foi amplificada para o sequenciamento. Dos 48 isolados, apenas 35,41% apresentaram produto de amplificação do gene nifH. A análise do BOX-PCR indicou que apenas os isolados codificados como 247 e 248, apresentaram 100% de similaridade, representados por perfis idênticos de padrão de bandas. Foram obtidos 16 isolados com diferentes padrões de bandas e que foram sequenciados. Os resultados do sequenciamento indicaram a presença de Leifsonia sp., Burkholderia sp., Burkholderia cepacia, Ochrobactrum intermedium, Rhizobium sp., Pantoea stewartii subsp. indologenes, Bacillus lentus, Paenibacillus sp., Pseudomonas putida e Enterobacter cloacae entre as bactérias isoladas de plantas de sisal. Embora a grande maioria destes isolados sejam conhecidos pela sua capacidade de fixação de nitrogênio, associados com outras culturas, e até mesmo em vida livre no solo, esta é a primeira vez que são reportados em associação com o sisal.