Resumo

Los miembros del genero Prototheca son algas unicelulares, aclorofilas y son las únicas plantas que pueden causar infección en humanos y animales. Se han descrito seis especies: P.wickerhamii, P.zopfii, P.blaschkeae, P.stagnora, P.ulmea y P.cutis, de la cuales se consideran patógenas: P.wickerhamii (infecciones en humanos), P.zopfii y P.blaschkeae, aisladas de mastitis bovina. Prototheca spp. esta ampliamente distribuida en el ambiente, en donde existe gran cantidad de materia orgánica con alto contenido de humedad. En 2011, se describió el primer caso de mastitis bovina en Chile causado por esta alga. El objetivo de este trabajo fue caracterizar molecularmente cepas de Prototheca aisladas en Chile. Un total de 412 muestras, de leche de tarro (95), leche de estanque (66), fecas de vacas (92), muestras de purines (127), y agua de bebederos (32) fueron recolectadas durante los años 2010 y 2011 en diferentes rebaños de la zona centro-sur de Chile y examinadas para Prototheca. Además, se incluyeron 33 muestras de leche de vacas con mastitis clínica de dos rebaños de la Región Metropolitana. Para el aislamiento de Prototheca se utilizó un medio selectivo PIM (Prototheca Isolation Media), los cultivos se incubaron a 37°C y examinados a las 72 h. A partir de colonias sospechosas en PIM se realizaron preparaciones con lactofenol para observar la morfología celular característica. La identificación a nivel de especie fue realizada por medio del sistema API 20C AUX (BIOMERIUX) y la caracterización molecular se realizó mediante PCR-RFLP del gen 18S rRNA. Prototheca fue aislada en 11(2,7%) muestras asociadas a rebaños lecheros y en 33(100%) muestras de leche de vacas con mastitis. P.zopfii fue aislada en 33(100%) muestras de mastitis clínica, 1 muestra de leche de estanque y 7 muestras de fecas de vaca. P.blaschkeae fue aislada en una muestra de agua de bebedero y desde 2 muestras de purines. El genotipo 1 de P.zopfii fue aislado sólo de muestras de fecas de vaca y el genotipo 2 de P.zopfii fue aislado de vacas con mastitis clínica y leche de estanque. Este es el primer estudio en Chile que reporta el aislamiento de Prototheca desde el ambiente asociado a rebaños lecheros y apoyan investigaciones previas, que han aislado el genotipo 1 de P.zopfii del ambiente y no a partir de casos de mastitis y aunque P.blaschkeae puede causar mastitis es más frecuente detectarlo en muestras ambientales.