XXI ALAM
Resumo:196-1


Poster (Painel)
196-1Imobilização por interação hidrofóbica, purificação e aplicação da lipase de Thermomucor indicae-seudaticae N31 produzida por fermentação em estado sólido
Autores:Ana Lucia Ferrarezi Duarte (UNESP - Universidade Estadual Paulista) ; Bruna Perissini (UNESP - Universidade Estadual Paulista) ; Roberto da Silva (UNESP - Universidade Estadual Paulista) ; Eleni Gomes (UNESP - Universidade Estadual Paulista) ; Jose M. Guisan (CSIC - Instituto de Catalisis) ; Benevides C. C. Pessela (CSIC - Instituto de Investigación en Ciencias de la Alimentación)

Resumo

Thermomucor indicae-seudaticae N31 é a única espécie de fungo termofílico descrito para a Classe Zygomycetes, Ordem Mucorales, Família Mucoraceae. E poucos trabalhos são relatados na literatura sobre a produção de enzimas por este fungo (proteases, pectinases, lipases e glucoamilases). Lipases são serino-hidrolases que catalisam a hidrólise e a síntese de ácidos graxos em uma interface lipídio-água. Apresentam algumas propriedades especiais que as tornam altamente seletivas aos ácidos graxos de cadeias longas, como: alta especificidade ao substrato e podem ser quimio, régio e enantioespecíficas. E são amplamente utilizadas em aplicações biotecnológicas. Assim, este trabalho objetivou a purificação, a imobilização e aplicação da lipase produzida pelo fungo termofílico T. indicae-seudaticae N31. A lipase foi produzida por fermentação em estado sólido, usando bagaço de cana de açúcar como substrato sólido, NH4Cl como fonte de nitrogênio e óleo de soja como indutor. O extrato bruto foi dialisado e submetido à imobilização utilizando Octil-sepharose como suporte, após a adsorção o sobrenadante foi retirado por filtração. E o derivado Octil-lipase submetido a um tratamento com Triton X-100 0,15% para liberação das enzimas anteriormente adsorvidas. O derivado Octil-lipase foi avaliado quanto ao efeito do pH na estabilidade da enzima e aplicado na hidrólise de óleo de sardinha para liberação de EPA (ácido eicosapentaenóico) e DHA (ácido docosahexanóico). A lipase parcialmente pura apresentou um fator de purificação de 0,8, 50% de rendimento e atividade específica de 2,8 U/mg. O derivado Octil-lipase foi estável em pH 5 e 10 preservando quase 100% da sua atividade e 50% de atividade residual em pH 7, após 5 horas de incubação. Entretanto, quando o derivado octil-lipase foi aplicado na hidrólise do óleo de sardinha o maior rendimento foi observado em pH 7, ao qual hidrolisou o óleo liberando 14% de EPA e 3% de DHA, e apresentando uma seletividade de 5:1 (EPA/DHA) após 96 horas de reação. Esses dados são promissores e mostram um possível potencial biotecnológico especialmente na hidrolise de óleos, visando o enriquecimento destes com ácidos graxos ômega-3.


Palavras-chave:  lipase, Thermomucor indicae-seudaticae, imobilização, omega 3, hidrólise