XXI ALAM
Resumo:99-1


Poster (Painel)
99-1Estandarización de una prueba de PCR Multiplex anidada para la detección y tipificación del virus de papiloma humano en lesiones neoplásicas cervicouterinas
Autores:Marwan Said Aguilar Mejia (UCV - Universidad Central de Venezuela) ; Kenia Ortega (UCV - Universidad Central de Venezuela) ; Marcilia Guzman (UCV - Universidad Central de Venezuela) ; Pedro Jose Michelli (UCV - Universidad Central de Venezuela) ; Cirana Vanessa Rodríguez (UCV - Universidad Central de Venezuela) ; Joseba Celaya Linaza (UCV - Universidad Central de Venezuela) ; Luis Orlando Herrera Sanchez (UCV - Universidad Central de Venezuela)

Resumo

El Virus Papiloma Humano (VPH) juega un papel muy importante en el desarrollo del cáncer de cuello uterino (CCU). En Venezuela esta enfermedad representa un gran problema de salud pública ocupando el segundo lugar de muerte por cáncer. Existen más de 100 genotipos diferentes del VPH y más de 30 de ellos están asociados con lesiones malignas; por tal motivo existe necesidad de conocer el genotipo del virus de VPH. El objetivo de este trabajo fue estandarizar una prueba de PCR multiplex anidada para la detección y tipificación del VPH con neoplasias intraepitelial cervical (NIC). Se realizó una multiplex PCR anidada, que combina cebadores degenerados consenso de los genes E6⁄E7, este puede detectar y tipificar el VPH de los siguientes genotipos: 6⁄11, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 42, 43, 44, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 y 68. Se estudiaron 91 pacientes, con biopsia sugestiva a cambios neoplásicos, de las cuales solo se les realizo la prueba a 79 de ellas, los amplicones obtenidos fueron secuenciados y alineados directamente por BLAST ® para confirmar la identificación de los genotipos. Se lograron tipificar 69,62% (55⁄79) de las pacientes encontrándose los genotipos de alto riesgo más comunes; 30,37% (24⁄79) resultaron positivas para la prueba pero no se logró detectar su genotipo. Los genotipos más frecuentes fueron los de bajo riesgo oncogénico 6⁄11 en 18,98% (15⁄79) y el genotipo 16 de alto riesgo con 13,92% (11⁄79). Se detectaron coinfecciones en 22,78% (18⁄79) de las pacientes positivas. En conclusión, este método es un instrumento sensible y útil para la detección del ADN del VPH, sobre todo para la determinación del genotipo y la identificación de infecciones múltiples el cual combinado con la persistencia viral representa un factor causal del CCU.


Palavras-chave:  VPH, PCR anidada Múltiplex, Cáncer de cuello Uterino