Resumo

Bacteroides é um gênero bacteriano composto por bastonetes gram-negativos, não esporulados e anaeróbios estritos. A espécie Bacteroides fragilis é componente da microbiota intestinal, beneficiando seus hospedeiros, já que fisicamente excluem os patógenos em potencial de colonizar o intestino. Além disso, tal espécie é considerada patógeno oportunista em humanos, com a capacidade de causar infecções na cavidade peritoneal e levar à formação de abscessos quando ocorre um trauma, por exemplo, no sítio de colonização. Em um processo infeccioso, as bactérias precisam burlar o sistema imune a fim de manter a infecção ativa, ou seja, necessitam escapar da atividade microbicida das células que o compõem, tais como os macrófagos. Estes últimos atuam pela produção de radicais livres como o óxido nítrico (NO), o qual é sintetizado pela enzima NO sintase induzível (iNOS). Ensaios anteriores, utilizando faloidina para marcação de filamentos de actina e imunocitoquímica para iNOS, além de dosagem de nitrito e microscopia eletrônica de transmissão e varredura, após infecção de macrófagos peritoneais de camundongos (MØ) com cepas de B. fragilis, mostraram que a espécie é capaz de alterar a atividade microbicida de macrófagos, diminuindo a resposta dos mesmos em NO, causando, inclusive, danos a membrana plasmática e alteração nos filamentos de actina. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi aprofundar as análises dos efeitos da interação de B. fragilis com MØ a fim de avaliar a necessidade de contato B.fragilis:MØ para observação dos efeitos e, também, estudar a participação de moléculas de superfície dos MØ nos eventos de interação. Para tanto, foram realizados experimentos com utilização de insertos de 0,4µm bem como análises de depleção parcial de colesterol após eventos de interação, associados à microscopia eletrônica de varredura. Os resultados apontam que a depleção de colesterol potencializa os efeitos da interação e, ainda, que tais efeitos independem do contato B. fragilis:MØ.