25º Congresso Brasileiro de Microbiologia
ResumoID:2428-1


Área: Microbiologia Geral ( Divisão H )

CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE ISOLADOS CLÍNICOS DO GÊNERO STENOTROPHOMONAS ATRAVÉS DOS GENES 16SRRNA, UVRB E NIFH.

Vinícius Godoy Cerezer (FM-USP); Patricia Locosque Ramos (CPB-USP); Rafael Costa Santos Rocha (ICB-USP); Nathália Fernandes Gonçalves Machado (ICB-USP); Heloiza Ramos Barboza (ICB-USP); José Gregório Cabrera Gomez (ICB-USP); Jacyr Pasternak (HI Albert Einstein); Carlos Alberto Moreira-filho (FM-USP)

Resumo

As Stenotrophomonas são comumente encontradas na rizosfera de plantas e trato respiratório de pacientes com doenças pulmonares crônicas ou imunodeprimidos. A espécie S. maltophilia tem sido alvo de uma série de estudos sobre a resistência a múltiplas drogas, já que esta associada a vários casos de óbitos em bacteremias, endocardites, e infecções do trato respiratório, principalmente em pacientes gravemente debilitados, imunodeprimidos ou com fibrose cística. Os métodos clássicos da taxonomia polifásica, tais como a hibridação DNA-DNA, Amplified Fragment Lenght Polymorphism (AFLP) e o sequenciamento do 16S rRNA tem auxiliado no estabelecimento da taxonomia de Stenotrophomonas.

No presente estudo isolados clínicos foram analisados a partir de amplificação e sequenciamento dos genes 16S rRNA e uvrB. Foi feito também uma análise comparativa entre os isolados clínicos e ambientais quanto à detecção do gene nifH, o resultado deste teste foi negativo para todos isolados clínicos e positivo para os isolados ambientais.

A partir da análise da árvore filogenética de 16S rRNA constituída por todas as linhagens-tipo, os isolados clínicos e o outgroup, foi possível observar a formação de dois grandes grupos. O primeiro grupo é formado por S. maltophilia, S. africana e todos isolados deste trabalho, já o segundo grupo é formado apenas pelas linhagens-tipo das espécies de origem ambiental. A análise da árvore de uvrB, constituída por todas as linhagens-tipo, os isolados clínicos e o outgroup, poderia ser interpretada como conflituosa quando comparada com os resultados obtidos através da árvore de 16S rRNA, no entanto, esse resultado pode ser explicado devido ao fato de o fragmento amplificado do gene uvrB apresentar tamanho em torno de 1200pb e a região sequenciada foi somente de 300pb, dessa forma um fragmento tão reduzido pode não ser informativo o suficiente ou incongruente para a taxonomia do gênero Stenotrophomonas. A não amplificação do gene nifH é uma evidência da possível perda do conjunto de genes nif pelos isolados clínicos. Do ponto de vista evolutivo, esta alteração genômica é muito importante para os isolados clínicos que não necessitam fixar nitrogênio para sobreviver nos hospedeiros. Dessa forma, os mutantes para os genes nif crescem e multiplicam-se mais rapidamente, apresentando grande vantagem para colonizar hospedeiros quando comparados a linhagens ambientais que apresentam os genes nif e fixam nitrogênio.

Apoio financeiro: FAPESP, CNPq e IIEPAE


Palavras-chave:  16SrRNA, caracterização molecular, housekeeping, nifH, Stenotrophomonas