AÇÃO SELETIVA DO ÓLEO ESSENCIAL DE APINIA SPECIOSA SOBRE VH⁺-ATPASE DE MEMBRANAS INTRACELULARES DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE

Flávia Paiva de Freitas (UENF); Scheila de Paula Oliveira Siqueira (UENF); Arnoldo Rocha Façanha (UENF); Francisco José Alves Lemos (UENF); Silverio Paivas de Freitas (UENF); Lev Alexaxandrovitch Okorokov (UENF)

Diante do alto índice de doenças causadas por microrganismos ou transmitidas por insetos tem aumentado o interesse na descoberta e uso de substâncias derivadas de plantas como fontes naturais de agentes antimicrobianos, larvicidas e inseticidas. O óleo essencial de Alpinia speciosa, OE, apresenta propriedade larvicida e antimicrobiana e desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a ação do óleo essencial de A. speciosa no transporte de H⁺ através de membranas intracelulares de S. cerevisiae. O óleo essencial de A. speciosa foi obtido de folhas secas por extração em destilador Clevenger. Membranas totais S. cerevisiae foram fracionadas em gradiente descontínuo de sacarose. Para determinação de transporte de H⁺ utilizamos MOPS-KOH 17,2 mM pH 7,4; sacarose 10,7%; KCl 0,5 mM, MgSO4 0,125mM, 1,7 mg/mL de proteína de membranas, diferentes concentrações do OE diluído em DMSO 0,1%, 1mM ACMA e ATP-Na 1mM.  OE (0,5 mg/mL) inibiu o transporte de H⁺ (“steady state“ de formação de DpH ) seletivamente nas organelas (9 % vacúolo, 32 % Golgi, 75 % envelope nuclear e retículo endoplasmático). A velocidade inicial foi inibida apenas nas membranas do envelope nuclear e retículo endoplasmático (65%). Esses resultados podem indicar que as VH⁺-ATPases são alvos da ação do óleo essencial de A. speicosa. Alguns trabalhos também mostram que ATPases são sensíveis a substâncias presentes em óleos essenciais. Moléculas de hidrocarbonetos presentes em óleos essenciais podem se acumular na bicamada lipídica, promovendo distorção na interação lipídeo-proteína, podendo ocorrer também interação direta entre hidrocarbonetos lipofílicos com sítios hidrofóbicos da proteína.  De acordo com esses resultados podemos concluir que as VH⁺-ATPases de organelas da via secretória de S. cerevisiae e/ou suas membranas apresentam diferentes sensibilidades ao OE de A. speciosa. Portanto este pode ser explorado como um agente potencial e seletivo no controle de fungos e leveduras patogênicos. Sabendo que VH⁺- ATPases apresentam papel crucial para homeostase iônica na diurese de insetos vetores este OE também pode ser explorado como agente potencial e seletivo no seu controle.