MICROESPECTROSCOPIA FT-IR DE CANDIDA ALBICANS E CANDIDA PARAPSILOSIS
Patrícia Marcondes dos Santos (UNIVAP); Kumiko Koibuchi Sakane (UNIVAP); Maria Angélica Gargione Cardoso (UNIVAP); Sônia Khouri (UNIVAP); Mituo Uehara (UNIVAP)
Resumo
Leveduras do gênero Candida são importantes causadoras de problemas de saúde e os maiores agentes de infecção hospitalar.Candida parapsilosis é uma importante espécie não-albicans que infecta pacientes hospitalizados e a segunda causa mais comum da candidíase invasiva em todo o mundo.
A identificação precoce permite um rápido diagnóstico da espécie patogênica de Candida, oferecendo uma maior eficácia terapêutica antifúngica, reduzindo a taxa de mortalidade e os custos associados à doença.
O objetivo deste trabalho é identificar e caracterizar espectros de cepas de Candida utilizando as técnicas de espectroscopia no infravermelho.
Os inóculos (Candida albicans - ATCC 10231 e Candida parapsilosis - ATCC 22019) foram preparados segundo 0,5 da escala de McFarland, semeado em superfície com alça de Drigalski em Agar Sabouraud e incubado por 12 horas a 37ºC. Seis alçadas calibradas de 1ml do microrganismo foram suspensos em 120 µl de solução salina estéril 0,9%. Desses, 10µl foram depositados em janela de CaF2 e submetido à estufa a 50ºC por 1 hora para obtenção de biofilme. Os espectros foram obtidos na faixa de 4000-1000 cm-1, por transmitância através de microespectroscopia (Spotlight 400) acoplado a um espectrofotômetro FT-IR (Perkin-Elmer).
Observou-se que a homogeneização do biofilme é essencial para a obtenção de espectros no infravermelho de boa qualidade.
Foram identificadas as bandas das amidas I e II de proteínas e peptídeos em 1650 e 1540cm-1.
As diferenças espectrais principais entre C.albicans e C.parapsilosis foram observadas na região de 1240-1000 cm-1 correspondentes aos estiramentos da ligação P=O do grupo fosfodiester e estiramento, principalmente, das ligações C-O, C-C de carboidrato.
Os dezoito espectros de cada cepa foram submetidos a uma análise estatística, sendo a análise de cluster o método aplicado. O programa Minitab separou os 36 espectros em dois grupos distintos.
Estes resultados são promissores quanto à utilização de Microespectroscopia FT-IR aliado ao Minitab, na investigação da possibilidade de identificação e caracterização rápida de subespécies de Candida.