PRODUÇÃO DE POLI-3-HIDROXIBUTIRATO E POLIHIDROXIALCANOATOS CONTENDO MONÔMEROS DE CADEIA MÉDIA POR ISOLADO BACTERIANO DE AMOSTRA DE LODO DE ESGOTO

Daniela Carolina Pinto E Lício (ICB/USP); Luiziana Ferreira da Silva (ICB/USP); José Gregório Cabrera Gomez (ICB/USP)

Polihidroxialcanoatos (PHA) são poliésteres produzidos por bactérias como reserva de carbono e energia, e suas propriedades termoplásticas vêm despertando o interesse industrial. A composição do PHA depende do fornecimento de uma fonte de carbono adequada que possa ser convertida a um hidroxiacil-CoA através das vias metabólicas existentes na célula, bem como da presença de uma PHA sintase na bactéria capaz de incorporar este hidroxiacil-CoA ao poliéster em formação. Ambos os fatores podem impedir a combinação de certos monômeros em uma mesma cadeia polimérica ou restringir a quantidade de um determinado monômero incorporado ao PHA. Isolados obtidos de amostra de lodo de esgoto doméstico ou industrial foram selecionados como produtores de PHA em meio contendo glicose ou octanoato como fonte de carbono. Dos 1200 isolados avaliados, 162 apresentaram a fluorescência característica do corante Nile Red A ou a coloração azul após tratamento com o corante Sudan Black B, para uma ou ambas as fontes de carbono testadas. No total, 75 isolados foram detectados como produtores de PHA a partir de glicose, 74 quando a fonte de carbono utilizada foi o octanoato e 13 isolados apresentaram resultado positivo para ambas as fontes de carbonos. Ensaios de produção de PHA em frascos agitados demonstraram a produção de PHA contendo monômeros de cadeia média (PHA_MCL) ou poli-3-hidroxibutirato (P3HB) por diferentes isolados. O isolado RMP 824-A produziu a partir de octanoato um PHA composto de 3-hidroxibutirato (32,69 mol%), 3-hidroxihexanoato (3,45 mol%), 3-hidroxioctanoato (58,90 mol%), 3-hidroxidecanoato (2,81 mol%) e 3-hidroxidodecanoato (2,15 mol%). Esta composição é compatível com a síntese de uma mistura de P3HB e PHA_MCL por esse isolado e sugere a existência de duas PHA sintases com especificidades diferentes nessa bactéria. Neste trabalho, linhagens bacterianas produtoras de PHA puderam ser encontradas em um ambiente altamente impactado pela ação humana, apresentando ainda diversidade com relação ao tipo de PHA produzido.